[发明专利]用于检测沙门氏菌的RPA引物、探针及检测方法在审
| 申请号： | 201810697598.2 | 申请日： | 2018-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN108588251A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 陈佳平;陈晶;黄静敏;陈血建;郭正洋;肖承荣;蔡琳;施棣欣;张永鑫;马芳草;杨国武 | 申请（专利权）人： | 深圳市计量质量检测研究院（国家高新技术计量站;国家数字电子产品质量监督检验中心） |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/04;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/42 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 | 代理人： | 胡玉 |
| 地址： | 518000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 沙门氏菌 检测 探针 引物 致病菌 特异性检测 技术支持 快速检测 上游引物 下游引物 引物序列 荧光检测 基因 基层 | ||
1.一种用于检测沙门氏菌的RPA引物，其特征在于，其引物序列如下：针对
上游引物SEQ ID No.1: 5’-GGAATGTCATACTTAGCGGGTTTGACACGAGC-3’
下游引物SEQ ID No.2:5’-GGTGGTATTTGACGCTGGCGGTGCAAACCT-3’。
2.如权利要求1所述的引物，其特征在于，采用上游引物、下游引物中的至少一种，或选自权利要求1所述的引物中的上游引物、下游引物序列或上游引物、下游引物序列的互补链序列中单条序列同源性为50%及以上的碱基序列。
3.一种用于检测沙门氏菌的RPA探针，其特征在于，其序列如下：针对
其长度为45-50bp，且在探针中间距5’端29bp 的位置处采用dSpacer修饰，dSpacer分子两侧的胸腺嘧啶分别被荧光基团和淬灭基团取代，并且在探针的3’末端通过阻塞基团C3Spacer修饰。
4.如权利要求3所述的用于检测沙门氏菌的RPA探针，其特征在于，所述荧光基因采用FAM，所述淬灭基团采用BHQ1。
5.一种用于检测沙门氏菌的RPA探针，其特征在于，采用如权利要求3所述的探针序列或其互补链序列中单条序列同源性为50%及以上的碱基序列。
6.一种用于RPA法检测沙门氏菌的试剂盒，其特征在于：包括如权利要求1所述的RPA引物和权利要求3所述的RPA探针。
7.一种检测沙门氏菌的RPA方法，其特征在于，包括如下几个步骤：
（1）提取待测样品的DNA；
（2）根据如权利要求1所述的序列组成合成RPA特异性引物，与根据权利要求3的序列组成合成RPA特异性探针；
在RPA反应管中进行扩增反应，同时利用荧光收集器收集荧光。
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