[发明专利]一种海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种海参牡蛎糖肽钙络合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一：将鲜海参洗净，去内脏，牡蛎壳肉分离洗净；然后将得到的海参体壁和牡蛎肉剪碎成小块，并置于95％乙醇中浸泡24h脱脂后室温下晾干；

步骤二：将所述步骤一脱脂后的海参碎肉和牡蛎碎肉按1:1～3混合，然后置于沸水中处理3～5min；所述海参碎肉与牡蛎碎肉混合物与沸水的质量体积比为1:10～20；然后在匀浆功率1500～3500r/min条件下均质5～10min，得到海参牡蛎肉均质液；

步骤三：在所述海参牡蛎肉均质液中加入蛋白酶进行酶解；所述蛋白酶的加入量为1500～2000U/g底物，酶解温度为55℃，酶解时间为3～6h；

酶解之后升温至100℃保持10min钝酶；然后4000r/min离心20min，取上清液并过滤去除不溶性成分，得到海参牡蛎糖肽溶液；

步骤四：向所述海参牡蛎糖肽溶液中加入1～6％的食品级H₂O₂，水浴加热至60℃，超声降解所述海参牡蛎糖肽溶液中大分子多糖；超声频率40HZ，超声功率为100W～400W，超声时间为1～6h；

反应完成后将pH值调至7.0，得解聚海参牡蛎糖肽溶液；

步骤五：将牡蛎壳粉与水按1:10～25混合并搅拌均匀，再加入冰醋酸搅拌反应2h；之后调节溶液pH值至8.0～14，继续搅拌反应30min后抽滤；然后将滤液回调至中性，得牡蛎醋酸钙溶液；所述牡蛎壳粉与冰醋酸的重量比为0.7～1.1：1；

步骤六：将所述牡蛎醋酸钙溶液与解聚海参牡蛎糖肽溶液按体积比2～1:1混合并调节混合液pH值至6-7，在35-45℃条件下搅拌40min后旋转蒸发浓缩；然后向浓缩液中加入10倍体积的无水乙醇沉淀，4℃下静置6h后抽滤取沉淀并冷冻干燥得海参牡蛎糖肽钙络合物。

2.根据权利要求1所述的海参牡蛎糖肽钙络合物的制备方法，其特征在于，所述蛋白酶为风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶或复合蛋白酶中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的海参牡蛎糖肽钙络合物的制备方法，其特征在于，所述牡蛎壳粉制备方法为：将牡蛎壳洗净，在电热干燥箱中80℃烘干6h，将烘干的牡蛎壳粉碎、过筛得牡蛎壳粉。

4.根据权利要求1～3任意一项所述的海参牡蛎糖肽钙络合物的制备方法，所制备的海参牡蛎糖肽钙络合物。

5.一种利用权利要求4所述的海参牡蛎糖肽钙络合物的制备方法得到的海参牡蛎糖肽钙络合物的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，其特征在于，将所述海参牡蛎糖肽钙络合物与D-氨基葡萄糖硫酸盐、药食同源提取物按重量比100:15～30:20进行复配，得海参牡蛎糖肽络合复配物。

6.根据权利要求5所述的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，其特征在于，所述药食同源提取物的制备方法为：将黄芪50-100份、淫羊藿54-100份、骨碎补30-55份以及怀牛膝48-90份，混合后加8～12倍60％乙醇回流提取，然后过滤浓缩，喷雾干燥，粉碎过60目筛制备而得。

7.根据权利要求5所述的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，其特征在于，所述海参牡蛎糖肽络合复配物中还包括促钙吸收剂。

8.根据权利要求7所述的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，其特征在于，所述促钙吸收剂为维生素D3、酪蛋白磷酸肽及Ⅱ型胶原蛋白中的一种或任意两种混合或者三种混合。

9.根据权利要求8所述的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，其特征在于，以所述海参牡蛎糖肽钙络合物为基准，所述维生素D3、酪蛋白磷酸肽以及Ⅱ型胶原蛋白的加入量分别为0.0001-0.0008％、2％-10％、5％-20％。

10.根据权利要求5～9任意一项所述的海参牡蛎糖肽钙络合复配物的制备方法，所制备的海参牡蛎糖肽钙络合复配物。