[发明专利]一种水稻DNA的简易提取方法在审
申请号: | 201810691119.6 | 申请日: | 2018-06-28 |
公开(公告)号: | CN108642051A | 公开(公告)日: | 2018-10-12 |
发明(设计)人: | 胡标林;陈春莲;罗潮洲;彭东华 | 申请(专利权)人: | 江西省农业科学院水稻研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 夏艳 |
地址: | 330200 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 沉淀 水稻DNA 简易 方法提取 无水乙醇 乙醇洗涤 研磨 离心管 研磨仪 产率 混匀 剪碎 氯仿 叶片 备用 颠倒 震荡 溶解 保存 安全 | ||
1.一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)从水稻幼苗上剪取叶片并剪成碎片,放入离心管中;
2)加入小钢珠和DNA提取液,在Tissuelyser-192组织研磨仪上震荡研磨;
3)加入氯仿颠倒混匀,静置后,离心至清晰分相,吸取上清液转入新的离心管中,弃枪头;
4)加入在-20℃冰箱预冷的无水乙醇,颠倒混匀;
5)离心至沉淀附于离心管底部,弃上清液,用乙醇洗涤沉淀,将离心管倒置,自然干燥;
6)加入1/10TE缓冲液溶解沉淀,样品置于-20℃冰箱中保存备用。
2.根据权利要求1所述的一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,所述的震荡研磨具体为:在25Hz下震荡研磨60s。
3.根据权利要求1所述的一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,所述的步骤(4)中冰箱的温度条件为-20℃。
4.根据权利要求1所述的一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,所述的离心条件均为11000rpm。
5.根据权利要求1所述的一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,所述的洗涤沉淀用的乙醇浓度为70%。
6.根据权利要求1所述的一种水稻DNA的简易提取方法,其特征在于,所述的DNA提取液为:10mL浓度为1M的Tris-HCl、10mL浓度为0.5M的EDTA、10mL浓度为5M的NaCl,最后利用ddH2O定容至100mL。
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