[发明专利]一种皱叶山姜的组织培养快繁方法

权利要求书

1.一种皱叶山姜的组织培养快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.外植体消毒：挑选有新芽的皱叶山姜地下茎，除去须根、茎尖、外层包裹的叶片，清理消毒，切分含有单个芽点的块茎作为外植体，对外植体进行消毒；

b.不定芽诱导：将外植体接种到不定芽诱导培养基中，诱导培养不定芽；所述的不定芽诱导培养基：每升含有6‐苄氨基腺嘌呤2.0～3.5mg、奈乙酸0.2～0.3mg、蔗糖20～30g、琼脂5.0～6.0g，余量为MS培养基，pH值为5.6～5.8；

c.不定芽增殖：切取不定芽，除去叶片和茎，留芽基部，将其接种到不定芽增殖培养基中，培养形成丛生芽；所述的不定芽增殖培养基：每升含有6‐苄氨基腺嘌呤1.5～3.0mg、奈乙酸0.1～0.3mg、蔗糖20～30g、琼脂5～6g，余量为MS培养基，pH值为5.6～5.8；

d.生根壮苗：切取单个丛生芽，将其接种到生根壮苗培养基中，培养形成生根苗；所述的生根壮苗培养基：每升含有奈乙酸0.3～0.8mg、蔗糖20～30g、琼脂5～6g，余量为MS培养基，pH值为5.6～5.8；

e.炼苗移栽：将生根苗取出，洗净根部培养基，经消毒后将生根苗移栽至栽培基质中，进行培养管理，获得皱叶山姜种苗。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤a的清理消毒是用体积分数75％乙醇水溶液冲洗干净；所述的步骤a的对外植体进行消毒是将外植体用体积分数75％乙醇水溶液浸泡20～30s，无菌水清洗1次；再用质量分数0.08％～0.12％升汞浸泡8～10min，无菌水冲洗4～6次。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤b、c、d中的培养条件为：温度27±2℃，光照强度1800～2300lx，光照时间10～14h/d。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的所述的步骤b、c、d中的培养条件为：温度27±2℃，光照强度2000lx，光照时间12h/d。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤e的消毒是将生根苗使用质量分数0.1％～0.3％百菌清溶液浸泡30～40min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤e的栽培基质为将细砂、珍珠岩和泥炭土以重量比1～2：1～2：3～4混匀得到的混合物。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤e的培养条件为：温度23～27℃，空气相对湿度70％～80％。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的不定芽诱导培养基：每升含有6‐苄氨基腺嘌呤3.0mg、奈乙酸0.3mg、蔗糖30g、琼脂5.5g，余量为MS培养基，pH值为5.8。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的不定芽增殖培养基：每升含有6‐苄氨基腺嘌呤2.0mg、奈乙酸0.15mg、蔗糖25g、琼脂5.5g，余量为MS培养基，pH值为5.8。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的生根壮苗培养基：每升含有奈乙酸0.5mg、蔗糖25g、琼脂5.5g，余量为MS培养基，pH值为5.8。