[发明专利]一种提高L-异亮氨酸产量的方法

说明书

本发明公开了一种提高L‑异亮氨酸产量的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明以以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)作为生产菌株，在以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)的发酵培养基中添加脂肪酸和/或氯高铁血红素以提高其产酸水平，成功将以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)产L‑异亮氨酸的产量从15g/L提高到了19g/L。

技术领域

本发明涉及一种提高L-异亮氨酸产量的方法，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

L-异亮氨酸是人体必需的八种氨基酸之一，同时又是三种支链氨基酸之一，是合成人体激素、酶类的原料，具有促进蛋白质合成和抑制其分解的效果，在人体生命活动中起着重要作用，现已被广泛运于生物医药、组织工程、光化学、电化学、食品工业、化妆品等领域。在国外，L-异亮氨酸还被其大量用于乳牛催乳、制备饲料添加剂以及生产功能饮料。

目前，常用微生物发酵法生产L-异亮氨酸。而现有的L-异亮氨酸生产菌主要有谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌、大肠杆菌、乳糖发酵短杆菌、以钝齿棒杆菌以及粘滞赛氏杆菌，其中，除谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌外，其余均的产酸能力均十分低下，只有谷氨酸棒杆菌与黄色短杆菌的三分之一到二分之一。

为提高乳糖发酵短杆菌、以钝齿棒杆菌以及粘滞赛氏杆菌等的产酸水平，已经有许多学者从菌株的角度，试图通过突变菌株、构建基因工程菌得到产酸水平提高的乳糖发酵短杆菌、以钝齿棒杆菌以及粘滞赛氏杆菌等。

但是，由于突变菌株的正向突变率极低、基因工程菌的构建也具有不确定性，因此，急需找到新的提高乳糖发酵短杆菌、以钝齿棒杆菌以及粘滞赛氏杆菌等菌产酸水平的思路。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种提高L-异亮氨酸产量的方法。此方法以以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)作为生产菌株，在以钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum)的发酵培养基中添加脂肪酸和/或氯高铁血红素以提高其产酸水平，成功将以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)产L-异亮氨酸的产量从15g/L提高到了19g/L。

本发明的技术方案如下：

本发明提供了一种提高L-异亮氨酸产量的方法，所述方法为将L-异亮氨酸生产菌株先接种于种子培养基中进行扩培，得到种子液，再将种子液接种于发酵培养基中进行发酵，得到发酵液；所述发酵培养基中添加有脂肪酸和/或氯高铁血红素。

在本发明的一种实施方式中，所述脂肪酸的添加量为3～5wt％。

在本发明的一种实施方式中，所述脂肪酸的添加量为3wt％。

在本发明的一种实施方式中，所述脂肪酸包含亚麻酸、亚油酸、油酸。

在本发明的一种实施方式中，所述氯高铁血红素的添加量为2～3wt％。

在本发明的一种实施方式中，所述氯高铁血红素的添加量为2wt％。

在本发明的一种实施方式中，所述L-异亮氨酸生产菌株为以钝齿棒杆菌(Corynebacterium crenatum)。

在本发明的一种实施方式中，所述种子培养基的成分包含葡萄糖90～100g/L、硫酸铵12～20g/L、玉米浆90～100g/L、磷酸二氢钾3～4g/L以及硫酸镁1～2g/L。

在本发明的一种实施方式中，所述种子培养基的成分包含葡萄糖96g/L、硫酸铵16g/L、玉米浆96g/L、磷酸二氢钾3.2g/L以及硫酸镁1.6g/L。

在本发明的一种实施方式中，所述种子培养基的pH为6～7。

在本发明的一种实施方式中，所述种子培养基的pH为6.8。