[发明专利]假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法在审
| 申请号: | 201810670495.7 | 申请日: | 2018-06-26 |
| 公开(公告)号: | CN108918843A | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
| 发明(设计)人: | 彭旭;甘华刚;古洪毅 | 申请(专利权)人: | 重庆市渝北区中医院 |
| 主分类号: | G01N33/48 | 分类号: | G01N33/48 |
| 代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 郑自群 |
| 地址: | 401120*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 假体 无菌性 松动 半定量检测 骨溶解 关节置换术 人工关节术 条件培养基 多核细胞 假体安装 结果分析 临床治疗 早期诊断 重要意义 重要影响 实验组 滴加 界膜 创伤 细胞 观察 | ||
1.一种假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,包括:
S1、取关节置换术患者假体安装位置的人工界膜组织处细胞,设置成对照组和实验组,均采用条件培养基进行培养,对照组在培养6~15d后,滴加酶,观察TRAP阳性多核细胞的变化并计数;
S2、将步骤S1中在条件培养基中培养后的实验组分为实验I组和实验Ⅱ组,将实验I组在含有CoCl2溶液及CrCl3溶液的混合液培养基中继续培养24~30h;实验Ⅱ组在原条件培养基中培养24~30h后,将原条件培养基更换为不含金属离子的条件培养基继续培养48~60h,分别收集实验I组、实验Ⅱ组的细胞及上清夜;
S3、分别检测步骤S2得到的上清液中的RANK蛋白、OPG蛋白的分泌量,计算实验I组、实验Ⅱ组中的RANK/OPG的比值;
S4、采集步骤S1中关节置换术患者的外周血单核细胞,检测患者外周血单核细胞中的CD14+CD16+单核细胞比例;
S5、采集正常人的外周血单核细胞,检测正常人外周血单核细胞中的CD14+CD16+单核细胞比例;
S6、根据步骤S1、S3、S4、S5得到的检测值,综合评判关节置换术患者假体无菌性松动的骨溶解情况。
2.根据权利要求1所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S1中所述酶为抗酒石酸酸性磷酸酶。
3.根据权利要求1所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S2中,所述混合液培养基中CoCl2溶液的浓度为10~15mg/L,CrCl3溶液的浓度为15~20mg/L。
4.根据权利要求1或3所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S2中,所述混合液培养基中CoCl2溶液的浓度为11~14mg/L,CrCl3溶液的浓度为16~18mg/L。
5.根据权利要求4所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S2中,所述混合液培养基中CoCl2溶液的浓度为13mg/L,CrCl3溶液的浓度为17mg/L。
6.根据权利要求1所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S3中,采用RANK试剂盒、OPG试剂盒分别检测步骤S2得到的上清液中的RANK蛋白、OPG蛋白的分泌量。
7.根据权利要求1所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S4中,采用流式细胞检测仪检测患者外周血单核细胞中的CD14+CD16+单核细胞比例。
8.根据权利要求1所述的假体无菌性松动骨溶解半定量检测方法,其特征在于,步骤S5中,采用流式细胞检测仪检测正常人外周血单核细胞中的CD14+CD16+单核细胞比例。
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