[发明专利]一种纯化索玛鲁肽的方法

说明书

本发明公开了一种纯化索玛鲁肽的方法，包括如下步骤：步骤一，索玛鲁肽粗品预处理得到索玛鲁肽粗肽水溶液；步骤二，以四烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸为流动相A，以乙腈为流动相B，进行第一次HPLC纯化，去除索玛鲁肽片段杂质；步骤三，除去溶剂，得到索玛鲁肽第一步样品溶液；步骤四，以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以乙酸铵溶液为流动相A；以乙腈为流动相B，进行第二次HPLC纯化，去除与索玛鲁肽理化性能相近的杂质；步骤五，除去溶剂得到索玛鲁肽第二步样品溶液，得到索玛鲁肽样品溶液；本发明经过两次HPLC纯化，第一次得到的样品纯度达92％，第二次得到的样品纯度为99％，提高了索玛鲁肽的纯度和收率。

技术领域

本发明涉及肽纯化的领域，特别是一种纯化索玛鲁肽的方法。

背景技术

中文名：索玛鲁肽

英文名：Sermaglutide

肽序列为：

H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys(Octadecanedioic-γ-Glu-PEG2-PEG2)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH；

索玛鲁肽由丹麦诺和诺德公司开发的第一个长效GLP-1类似物，与人胰高糖素样肽-1(GLP-1)同源性达97％。与索玛鲁肽相比，修饰后的索玛鲁肽亲水性增强，抑制DPP-4酶的水解，延长生物半衰期，长效降低血糖，促进胰岛细胞再生，延长胃排空等多种作用索玛鲁肽具有降低血糖，促进胰岛细胞再生，轻微延长胃排空等多种作用，应用前景广泛。

索玛鲁肽作为新一代以肠促胰岛素为基础的降血糖药物，不仅作用时间长，而且充分保留了天然GLP-1的多项生理活性，可安全有效降糖并可能对多种心血管危害因素起保护作用。索玛鲁肽注射剂经皮下注射给药，血药浓度达峰时间为20～14小时，半衰期为11～13小时，每日注射一次，提供24h的血糖控制，其药代动力学特性不受性别或年龄影响。索玛鲁肽绝对是2型糖尿病治疗领域革命性药物。

固相合成索玛鲁肽，合成物中会产生多种影响样品的纯度和收率的杂质，通过现有纯化技术分离得到索玛鲁肽样品纯度低，收率低；本发明解决这样的问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种纯化索玛鲁肽的方法，本发明经过两次HPLC纯化，第一次得到的样品纯度达92％，第二次得到的样品纯度为99％，提高了索玛鲁肽的纯度和收率。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种纯化索玛鲁肽的方法，包括如下步骤：

步骤一，索玛鲁肽粗品预处理得到索玛鲁肽粗肽水溶液；

步骤二，以四烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸为流动相A，以乙腈为流动相B，进行第一次HPLC纯化，去除索玛鲁肽片段杂质；

步骤三，除去溶剂，得到索玛鲁肽第一步样品溶液；

步骤四，以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以乙酸铵溶液为流动相A；以乙腈为流动相B，进行第二次HPLC纯化，去除与索玛鲁肽理化性能相近的杂质；

步骤五，除去溶剂得到索玛鲁肽第二步样品溶液，得到索玛鲁肽样品溶液。

前述的一种纯化索玛鲁肽的方法，步骤一，索玛鲁肽粗品预处理得到索玛鲁肽粗肽水溶液；预处理步骤包括：

1)将索玛鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到索玛鲁肽粗肽水溶液；

2)取索玛鲁肽水溶液用滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用。