[发明专利]一种纯化索玛鲁肽的方法

权利要求书

1.一种纯化索玛鲁肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，索玛鲁肽粗品预处理得到索玛鲁肽粗肽水溶液；

步骤二，以四烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.2%磷酸为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为230nm，进行第一次HPLC线性梯度洗脱，收取含有索玛鲁肽样品的馏分；所述固定相的粒度为10μm，所述0.2%磷酸的制备方法为：取1000ml水，加2ml磷酸，混合均匀，用氨水调节pH值至2.3得到0.2%磷酸；进行第一次HPLC纯化，去除索玛鲁肽片段杂质；

步骤三，除去溶剂，得到索玛鲁肽第一步样品溶液；

步骤四，以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以20mmol/L的乙酸铵溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为230nm，进行第二次HPLC梯度洗脱，收取含有索玛鲁肽样品的馏分；所述20mmol/L的乙酸铵溶液的制备方法为：取1000ml水加乙酸铵1.54g，氨水调节pH至7.5得到20mmol/L的乙酸铵溶液；进行第二次HPLC纯化，去除与索玛鲁肽理化性能相近的杂质；

索玛鲁肽片段杂质包括：H-His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-OH，H-Ala-Ala-Lys(Octadecanedioic-γ-Glu-PEG2-PEG2)-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Arg-Gly-Arg-Gly-OH；

与索玛鲁肽理化性能相近的杂质包括：D-His¹、D-Ser¹⁰、D-Ala¹⁹、D-Glu²¹、D-Arg³⁰、Endo-Gly³¹、Endo-Gly²⁹、Des-Gly¹⁶；

步骤五，除去溶剂得到索玛鲁肽第二步样品溶液，得到索玛鲁肽样品溶液。

2.根据权利要求1所述的一种纯化索玛鲁肽的方法，其特征在于，步骤一，索玛鲁肽粗品预处理得到索玛鲁肽粗肽水溶液；所述预处理的步骤包括：

将索玛鲁肽粗品溶于乙腈水溶液中得到索玛鲁肽粗肽水溶液；

取索玛鲁肽水溶液用滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用。

3.根据权利要求1所述的一种纯化索玛鲁肽的方法，其特征在于，步骤三，用旋转蒸发器水浴温度在30~35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到索玛鲁肽第一步样品溶液，样品溶液为碱性。

4.根据权利要求1所述的一种纯化索玛鲁肽的方法，其特征在于，步骤五，用旋转蒸发器水浴温度在30~35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到索玛鲁肽样品溶液，样品溶液为酸性。