[发明专利]海洋真菌HK1-6中溴代嗜氮酮及三环聚酮衍生物与作为抗MRSA药物的应用

说明书

本发明涉及海洋真菌HK1‑6中溴代嗜氮酮及三环聚酮衍生物与作为抗MRSA药物的应用，所述溴代嗜氮酮及三环聚酮衍生物结构如下：

技术领域

本发明属于海洋真菌次级代谢产物领域，具体涉及海洋真菌HK1-6中溴代嗜氮酮及三环聚酮衍生物与作为抗MRSA药物的应用。

背景技术

申请人在先前研究(中国发明专利申请号：2017114173936；J.Nat.Prod.，2017，80(4)，pp 1081-1086)中公开了系列分离自海洋真菌Penicillium sp.HK1-6的嗜氮酮类化合物penicilones A-D。化合物penicilones A-D对MRSA(如S.aureus ATCC43300和S.aureusATCC33591)以及VER(如E.faecalis ATCC51299)均显示出很强的抗菌活性，MIC≤12.5μg/mL，尤其是penicilone B对E.faecalis ATCC51299的MIC比阳性药万古霉素强一倍，显示出了将其开发作为抗耐药菌药物、药物先导化合物以及候选药物的良好前景。本发明通过将海洋真菌HK1-6的菌种培养基和发酵培养基中的粗海盐替换为溴化钠后，获得了两个新溴代嗜氮酮类化合物5-溴-penicilone A和5-溴-penicilone B以及两个新三环聚酮衍生物。

发明内容

本发明所述的海洋真菌HK1-6同在先申请(申请号：2017114173936)中的海洋真菌Penicillium sp.HK1-6，保藏编号为CGMCC No.12762，来源于红树林根际土壤。

本发明提供一类由上述海洋真菌HK1-6产生的次级代谢产物1-4或其药学上可接受的盐，其特征在于所述次级代谢产物1-4具有如下结构：

本发明提供一种化合物1-4或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)先在菌种培养基中对海洋真菌HK1-6进行菌种培养；

(2)再在发酵培养基中对步骤(1)中的海洋真菌HK1-6进行发酵培养；

(3)将步骤(2)发酵培养得到的发酵物中的发酵液和菌体分离，发酵液用有机溶剂A萃取1～5次，优选3～5次，合并萃取液后减压浓缩得到发酵液浸膏；菌体用有机溶剂B浸提1～5次，优选3～5次，合并浸提液后减压浓缩得到菌体浸膏；合并发酵液浸膏和菌体浸膏后，经过减压硅胶柱层析，洗脱剂依次采用石油醚、乙酸乙酯、甲醇各洗脱5个柱体积，将乙酸乙酯洗脱得到流份浓缩后，先经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为CHCl₃∶MeOH＝1∶1，再经高效液相色谱HPLC制备，先采用MeOH∶H₂O＝80∶20作为流动相分离得到化合物2-4，再采用MeOH∶H₂O＝75∶25作为流动相分离得到化合物1。所用色谱柱为Agilent C18，9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min。本发明制备方法中涉及洗脱剂、流动相等比例的均指体积比。

其中所述菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、溴化钠、水，发酵培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、溴化钠、水。

本发明上述制备方法中，所述的有机溶剂A优选乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿或乙醚中的一种或几种；所述的有机溶剂B优选甲醇、乙醇、THF或丙酮中的一种或几种。