[发明专利]一种硅藻荧光染色液及检测脏器组织的硅藻检验方法有效
| 申请号: | 201810657303.9 | 申请日: | 2018-06-25 |
| 公开(公告)号: | CN108844802B | 公开(公告)日: | 2020-09-22 |
| 发明(设计)人: | 孙鑫;李畅;王基锋;张广清;蒋周莹;胡彬彬;韩芳芳;黄亮 | 申请(专利权)人: | 孙鑫;李畅;王基锋;张广清;蒋周莹;胡彬彬;韩芳芳;黄亮 |
| 主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N21/64 |
| 代理公司: | 郑州立格知识产权代理有限公司 41126 | 代理人: | 田磊 |
| 地址: | 450000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 硅藻 荧光 染色 检测 脏器 组织 检验 方法 | ||
1.一种硅藻荧光染色液,其特征在于,由以下重量百分比的组分组成:荧光素8-12%、媒染剂3-7%、氢氟酸0.1-0.5%,其余为去离子水。
2.如权利要求1所述的硅藻荧光染色液,其特征在于,由以下重量百分比的组分组成:荧光素10%、媒染剂5%、氢氟酸0.3%,其余为去离子水;媒染剂为铝盐。
3.采用权利要求1所述的硅藻荧光染色液检测脏器组织的硅藻检验方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将脏器组织硝解后制得的消化液涂于载玻片上,干燥制得待检组织涂片,向待检组织涂片上滴加硅藻荧光染色液,于35-40°C下,保温15-30min,冲洗,于60-80°C下,干燥4-6min;
2)向步骤1)干燥后的待检组织涂片滴加脱色液,静置3-5s,冲洗,于60-80°C下,干燥4-6min,所述待检组织涂片上的消化液、硅藻荧光染色液与脱色液的体积用量比为(90-110)μL︰(90-110)μL︰(90-110)μL。
4.如权利要求3所述的检测脏器组织的硅藻检验方法,其特征在于,步骤1)脏器组织为肺组织,向步骤2)干燥后的待检组织涂片滴加复染液,静置3-5s,冲洗,于60-80°C下,干燥4-6min,得待检样品;复染液由以下重量百分比的组分组成:高锰酸钾1.5-2.5%、双氧水0.4-0.7%,其余为去离子水,所述待检组织涂片的消化液与复染液的体积用量比为(90-110)μL︰(90-110)μL。
5.如权利要求4所述的检测脏器组织的硅藻检验方法,其特征在于,所述脱色液由以下重量百分比的组分组成:盐酸5-7%、乙醇75-85%,其余为去离子水。
6.如权利要求3所述的检测脏器组织的硅藻检验方法,其特征在于,步骤1)待检组织涂片由以下方法制得:
1)剪取脏器组织,然后依次加入无水乙醇和硝酸,溶解后,于60-70°C下,静置消化10-15h后,冷却至室温,分离出油脂,所述脏器组织、无水乙醇和硝酸的用量比为20g︰3ml︰50ml;
2)步骤1)分离出油脂后,加入蒸馏水,于3800-4200 r/min下,离心12-18min,弃上清液,混匀后重复加入蒸馏水、离心、弃上清液,直至上清液pH值为6.5-7.5,得消化液;
3)取100μL步骤2)消化液涂于载玻片上,于40-70°C下,干燥4-6min,得待检组织涂片。
7.如权利要求6所述的检测脏器组织的硅藻检验方法,其特征在于,所述脏器组织取自溺水尸体的肝、肾或肺组织。
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