[发明专利]一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法在审
| 申请号： | 201810654176.7 | 申请日： | 2018-06-22 |
| 公开（公告）号： | CN108864222A | 公开（公告）日： | 2018-11-23 |
| 发明（设计）人： | 仲玉;任连兵 | 申请（专利权）人： | 南京亘闪生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07H15/256 | 分类号： | C07H15/256;C07H1/06 |
| 代理公司： | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人： | 顾进 |
| 地址： | 210047 江苏省南京市江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 色谱柱 甜菊糖苷 乙醇 混合溶液 母液糖 收集液 高纯度 浓缩液 洗脱液 制备 冲洗 混合溶液中 树脂分散 超纯水 超声水 混合液 上样液 稀释液 样品液 重结晶 树脂 搅匀 浓液 上样 稀释 洗脱 压实 装入 浓缩 合并 检测 平衡 | ||
1.一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于,具体步骤如下：
（1）色谱柱装柱、冲洗：将树脂分散于乙醇和水的混合溶液中，搅拌均匀，并装入至色谱柱中，用乙醇和水的混合溶液冲洗压实色谱柱床并浸泡2h，超纯水冲洗至流出液无醇味；
（2）样品制备：取甜菊糖苷母液糖浓液并用超纯水稀释，制成母液糖稀释液，备用；
（3）上样：将步骤（2）得到的样品液连续流过色谱柱；
（4）平衡：待上样结束后，用超声水冲洗色谱柱；
（5）洗脱：色谱柱平衡结束后，以乙醇和水的混合溶液为洗脱液对色谱柱进行洗脱，根据UV检测情况，收集流出液，检测纯度；将纯度合格的收集液合并，得到收集液；
（6）浓缩：将收集液浓缩，得到浓缩液；
（7）重结晶：将浓缩液重结晶，可得到RD和RM。
2.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中树脂为Super 200-X19。
3.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）乙醇和水的混合溶液中乙醇和水的体积比为1-89:9；乙醇和水的混合溶液中乙醇的浓度为90%。
4.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中用乙醇和水的混合溶液冲洗色谱柱的速度为每小时1-4倍的柱体积。
5.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中母液糖稀释液的浓度为2-50%。
6.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中样品液经过色谱柱的速度为每小时1-4倍柱体积。
7.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中柱体积树脂和母液糖浓液的体积比为100:1-4。
8.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）中超声水的体积为柱体积的1-3倍。
9.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）乙醇和水的混合溶液中乙醇和水的体积比为1-21:9。
10.根据权利要求1所述的一种高纯度甜菊糖苷RD和RM的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）中乙醇和水的混合溶液为对色谱柱进行洗脱时，速度为每小时1-4倍柱体积。
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