[发明专利]肠道菌群的荧光检测试剂盒

权利要求书

1.10种DNA荧光探针在制备利用荧光流式细胞技术检测粪便中肠道菌群的检测试剂盒中的应用，其特征在于，所述DNA荧光探针为3’端或者5’端的碱基上偶联有荧光物质的分离的核酸，所述分离的核酸的序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ IDNo.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6、SEQ ID No.7、SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ IDNo.10；所述检测试剂盒进一步含阳性对照探针，所述阳性对照探针3’端或5’端结合有荧光物质，所述阳性对照探针的序列为GTGSTGCAYGGYYGTCGTCA；所述试剂盒进一步含有用于提取细菌DNA的试剂，所述试剂为纳米磁珠悬浮提取核酸的试剂；采用纳米磁珠颗粒悬浮提取核酸的方法提取粪便的细菌DNA，所述的DNA荧光探针与提取自粪便的细菌DNA杂交，在杂交之后利用荧光流式细胞技术检测，所述的肠道菌群是艰难梭菌、沙门氏菌、志贺氏菌、空肠弯曲菌、肠出血性大肠杆菌、肠炎弧菌和鼠疫杆菌。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的荧光物质为Alexa488。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的荧光物质偶联在分离核酸的5’端。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，在所述阳性对照探针核酸序列5’端连接Alexa488荧光染料。

5.如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述检测试剂盒进一步含有用于悬浮结合了DNA荧光探针后的细菌DNA的PBS溶液。

6.如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述检测试剂盒进一步含有用于悬浮提取获得的细菌DNA的重悬液，所述重悬液的组成为：10 mM Tris-HCl，pH 8。

7.如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述检测试剂盒进一步包含的纳米磁珠悬浮提取核酸的试剂：裂解液、清洗液和磁珠；所述裂解液的组成为：500 mM Tris，16mM EDTA，10 mM NaCl，pH 9.0；所述清洗液的组成为：100 mM Tris-HCl，pH 7.5，1.5 MLiCl，1 mM EDTA；所述磁珠为表面包覆硅质膜的磁珠。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述磁珠为Dynabeads的磁珠。