[发明专利]一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽及其制备方法

说明书

本发明涉及功能性食品加工领域，具体公开了一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽及其制备方法，所述制备方法包括：将蜂蛹蛋白液先经过碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解，再经过木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的酶解，最后经过风味蛋白酶的酶解，收集分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，再经过层析分离纯化，即得蜂蛹蛋白肽。本发明以蜂拥为原料，通过对蜂蛹的超高压、高温、高频超声波等预处理，在不添加任何酸和碱条件下，利用多种蛋白复合酶进行分步酶解，通过膜分离、凝胶分离及反相HPLC分离技术，开发了具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽。

技术领域

本发明涉及功能性食品加工领域，具体地说，涉及一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽及其制备方法。

背景技术

高血压是对人类健康危害极大的一种疾病，潜伏期长。高血压的早期阶段，一般没有明显不适症，直至发生临床迹象心脏病发作、脑血管破裂而导致死亡。

血管紧张素转化酶(Angiotensin I converting enzyme，ACE)为肾素-血管紧张素系统的关键酶。血管紧张素原在肾素的作用下转化为血管紧张素I，血管紧张素I在ACE的作用下转化为血管紧张素II，刺激血管收缩，造成血压上升。抑制ACE的活性对血压控制有着积极的作用，因而开发有效的ACE抑制剂引起人们的极大关注。虽然来源于食物的ACE抑制肽比人工合成的ACE抑制剂作用弱，但是它有其独特的优点，不会产生降压过度的问题，安全性高，无副作用，除降压功能外，往往同时具有免疫促进、易消化吸收等功能。由于药物疗法存在副作用，天然食物中的降血压功能因子的开发利用将成为今后高血压非药物治疗的重要部分。

疲劳是机体脑力或体力到达一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象。它是防止机体发生威胁生命的过度机能衰竭所产生的一种保护性反应。抗疲劳肽不仅可以提供人体所必需的氨基酸和能源物质、同时又能够维持机体酶的活性以及内环境的稳定、增强抗氧化能力、防止神经递质失衡等诸多功能特性，抗疲劳肽主要通过增强肌肉力量、提高机体运动耐力，从而迅速消除或延迟疲劳的产生，帮助恢复和增强体力。

目前国内外专利中未见利用蜂蛹蛋白资源制备ACE抑制肽的专利文献报道，关于利用蜂蛹开发具有ACE抑制和抗疲劳功能的蛋白多肽方面的研究很少，目前国内外均未见利用蜂蛹蛋白资源制备具有ACE抑制和抗疲劳功能肽的文献报道。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明以蜂蛹为原料，经过大量的实验，开发了一种具有较好ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽及其制备方法。

第一方面，本发明首先提供一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽的制备方法，所述制备方法包括：将蜂蛹蛋白液先经过碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解，再经过木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的酶解，最后经过风味蛋白酶的酶解，收集分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，再经过层析分离纯化，即得所述蜂蛹蛋白肽。

进一步地，所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的质量之和为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.2％-0.5％，所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的质量比为1-2:1；所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解条件为在50-60℃下进行酶解反应0.5-1.5h。

所述木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的质量之和为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.1％-0.4％，所述木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的酶解条件为在45-55℃下进行酶解反应0.5-1.5h。

所述风味蛋白酶的质量为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.1％～0.2％，所述风味蛋白酶的酶解条件为在50～60℃下进行酶解反应0.25～0.5h。

进一步地，经风味蛋白酶酶解后，将所得酶解液置于90-95℃下保温10-20分钟，冷却至室温，加入酶解液质量0.1％-0.3％的活性炭于酶解液中，通过硅藻土进行分离，收集分离液；再对所述分离液进行超滤，收集分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液。