[发明专利]一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽及其制备方法

权利要求书

1.一种具有ACE抑制和抗疲劳功能的蜂蛹蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将蜂蛹蛋白液先经过碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解，再经过木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的酶解，最后经过风味蛋白酶的酶解，收集分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液，再经过层析分离纯化，即得；其中，所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的质量之和为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.2％-0.5％，所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的质量比为1-2:1；所述木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的质量之和为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.1％-0.4％；所述风味蛋白酶的质量为蜂蛹蛋白液中蛋白质量的0.1％～0.2％。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解条件为在50-60℃下进行酶解反应0.5-1.5h。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的酶解条件为在45-55℃下进行酶解反应0.5-1.5h。

4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述风味蛋白酶的酶解条件为在50～60℃下进行酶解反应0.25～0.5h。

5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，经风味蛋白酶酶解后，将所得酶解液置于90-95℃下保温10-20分钟，冷却至室温，加入酶解液质量0.1％-0.3％的活性炭于酶解液中，通过硅藻土进行分离，收集分离液；再对所述分离液进行超滤，收集分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述超滤为二步处理，先利用孔径为5000道尔顿的陶瓷膜超滤，将分子量小于5000道尔顿的蛋白和多肽分离出来，再利用孔径为2000道尔顿的陶瓷膜超滤，将分子量小于2000道尔顿的蛋白肽分离出来。

7.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，将所述分子量小于2000道尔顿的蛋白肽液经过Sephadex G-25凝胶分离，洗脱液为去离子水，洗脱峰在280nm下进行检测，收集第2个洗脱峰；再用RP-HPLC反相高效液相色谱进行1次分离，反相HPLC的分离条件是以5-90％乙腈溶液作为洗脱液，取15-16分收集的肽溶液，通过浓缩、冷冻干燥，得到蜂蛹蛋白肽粉。

8.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述蜂蛹蛋白液以蜂蛹为原料，经100-200Mpa超高压处理后，加入1-3倍水，在115-125℃条件下处理1-2小时，冷却到60-85℃后，进行打浆、离心、去脂，再置于65-75℃下经90-120kH超声波处理20-30分钟而得。

9.由权利要求1-8任一项所述的制备方法制备得到的蜂蛹蛋白肽。

10.权利要求9所述的蜂蛹蛋白肽在制备功能性食品方面的应用。