[发明专利]一种用于检测肺炎克雷伯杆菌的试剂盒和方法在审
| 申请号: | 201810638062.3 | 申请日: | 2018-06-20 |
| 公开(公告)号: | CN108950027A | 公开(公告)日: | 2018-12-07 |
| 发明(设计)人: | 唐卓;张磊;杜凤;周静;董娟;袁明铭;董涵 | 申请(专利权)人: | 中国科学院成都生物研究所;四川省中医药科学院 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/22 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 610041 *** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 肺炎 检测 试剂盒 发明试剂 准确检测 灵敏度 杆菌 探针 引物 应用 | ||
1.SEQ ID NO.1~2所示的引物对。
2.SEQ ID NO.3所示的探针。
3.SEQ ID NO.1~2所示的引物对和SEQ ID NO.3所示的探针在制备检测肺炎克雷伯杆菌的试剂中的用途。
4.根据权利要求3所示的用途,其特征在于:所述试剂是检测肺炎克雷伯杆菌的试剂。
5.一种用于检测肺炎克雷伯杆菌的试剂盒,包括:DNA提取试剂、PCR反应液、酶混合液、阴性质控品、阳性质控品和灭菌水,PCR反应液中用于核酸扩增反应的引物为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,PCR反应液中用于信号监测的寡核苷酸探针为荧光探针,具体为在SEQ ID NO.3所示的探针的5’端加荧光基团、3’端加荧光淬灭基团。
6.一种检测肺炎克雷伯杆菌的方法,其特征在于:它包括如下步骤:
(1)提取样本DNA:取待检样本,用DNA提取试剂提取待检样本中的DNA;
(2)基因扩增:用权利要求5所述的试剂盒中的PCR反应液、酶混合液、灭菌水按比例混合,对待检样本中的DNA进行扩增,扩增程序为94℃1min;94℃5s,60℃10s收集荧光,进行50个循环;
(3)结果检测:通过荧光曲线对DNA扩增结果进行判定。
7.权利要求6所述待检样本可以为实验动物回盲部内容物或病灶组织、食品样本、临床咽拭子、鼻咽分泌物或痰液样本。
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