[发明专利]PCR纯化试剂及使用该试剂纯化PCR产物的方法

权利要求书

1.PCR纯化试剂，其特征在于，它包括DNA结合液和洗涤液，所述DNA结合液的配方为：3mol/L氯化钠、体积浓度为30％乙醇；所述洗涤液的配方为：10mmol/L Tris.HCl、100mmol/L NaCl、1mmol/L EDTA、体积浓度80％乙醇，Tris.HCl的pH值为8.0。

2.PCR产物纯化的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将PCR产物转移至无菌离心管中，向离心管加入5倍体积的权利要求1所述的DNA结合液并用移液枪将PCR产物与DNA结合液彻底匀；

(2)将PCR产物混合液转移至PCR产物纯化用的硅柱中，置于离心机中以12000rpm速度离心1分钟，弃收集管中废液；

(3)向硅柱中加权利要求1所述的洗涤液，置于离心机中以12000rpm速度离心1分钟，弃收集管中废液；将硅柱重置于离心机中，以相同的速度离心1分钟，去除硅柱中的残留液；

(4)将硅柱转移至无菌离心管中，向硅柱中加入去离子蒸馏水，将硅柱与离心管转移至离心机中以12000rpm速度离心1分钟；

(5)将洗脱的DNA进行定量和琼脂糖凝胶电泳检测。

3.根据权利要求2所述的PCR产物纯化的方法，其特征在于，硅柱为再生硅柱。

4.根据权利要求3所述的PCR产物纯化的方法，其特征在于，再生硅柱通过以下方法制备：

(1)取使用后的一次性硅柱置于收集管中，加0.75mL蒸馏水，进行离心分离并弃去废液；

(2)加入1mol/L磷酸溶液0.5mL，静置3分钟进行离心分离并弃去废液；重复该步骤五次；

(3)用0.75mL蒸馏水清洗硅柱，进行离心分离并弃去废液；

(4)将硅柱移至无菌离心管中，再次离心分离，除尽硅柱中残留水分，即得到再生硅柱。