[发明专利]采用微生物细胞制备糖基化葛根素的方法

权利要求书

1.采用微生物细胞制备糖基化葛根素的方法，其特征在于包括采用海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16在非水相中催化葛根素和糖基供体进行反应，得到糖基化葛根素的步骤；海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16的保藏号为CCTCC NO：M 2013154；所述糖基供体为蔗糖。

2.根据权利要求1所述制备糖基化葛根素的方法，其特征在于反应溶剂是亲水性有机溶剂和pH为4.0~9.0缓冲液的混合物，所述亲水性有机溶剂的体积百分含量为10%~30%，所述亲水性有机溶剂选自二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇中的一种或者两种以上的混合物。

3.根据权利要求2所述制备糖基化葛根素的方法，其特征在于海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16固定化后在非水相中催化葛根素和糖基供体进行反应；所述固定化方法如下：将海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16悬浮液与海藻酸钠溶液混合均匀，再滴至CaCl₂溶液中，得到固定化细胞；所述海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16悬浮液的OD₆₈₀为4.0-6.0，CaCl₂溶液的浓度为10-40g/L，海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16悬浮液与海藻酸钠溶液混合后海藻酸钠的浓度为10-50g/L；固定化细胞包埋量为20~60%。

4.根据权利要求3所述制备糖基化葛根素的方法，其特征在于转化体系中，葛根素的浓度为5~80g/L，蔗糖的浓度为50~500 g/L；固定化细胞与转化体系的体积比为5～50:100，所述转化体系是在反应溶剂中添加葛根素和蔗糖后形成的；反应温度为15~45℃，反应时间为1~36h。

5.根据权利要求4所述制备糖基化葛根素的方法，其特征在于海洋微杆菌（Microbacterium thalassium）NJ16采用发酵培养基在20~40℃发酵培养6~24h，所述发酵培养基含有如下成分：蔗糖 5~40 g/L，酵母粉2~30 g/L，KH₂PO₄ 0.5~5 g/L，MgSO₄ 0.1~2g/L，pH 6~8。

6.根据权利要求5所述制备糖基化葛根素的方法，其特征在于糖基化葛根素采用如下方法纯化：反应结束后，过滤收集固定化细胞，采用AB-8型大孔树脂层析分离滤液中的糖基化葛根素。