[发明专利]一种博落回中抗乳腺癌活性成分的制备方法

权利要求书

1.一种分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，包括以下步骤：

（1）将博落回生物碱粗样采用酸溶、碱沉的方法进行二次分离处理；

（2）将二次处理的博落回生物碱总样采用 pH 区带逆流色谱进行分离和富集，得到相应的组分，溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：异丙醇：水，体积比为 1:3:1.5:4.5；将所述溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待上下两相分开；上相中加入三乙胺为保留碱，下相加入三氟乙酸作为洗脱酸，将所述博落回生物碱总样溶解于 10 mL 碱化的上相和 10mL 未酸化的下相待用；所述上相为固定相，所述下相为流动相。

2.如权利要求 1 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，所述步骤（1）具体操作为：将博落回生物碱粗样溶解于 pH 值为 2 的水溶液中，用 30–50μ m中速滤纸过滤，滤液调 pH 值至 9，生物碱充分沉淀后，采用离心机 3000 转/分钟离心，移除上层溶液，下层沉淀物即得博落回生物碱总样。

3.如权利要求 2 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，所述水溶液用 HCl 调节至 pH 值为 2。

4.如权利要求 2 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，所述滤液用 10%的稀氨水调 pH 值至 9。

5.如权利要求 1 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，所述步骤（2）的具体操作为：采用半制备型高速逆流色谱仪，首先使进样阀处于进样状态，将固定相用泵以一定流速灌满色谱分离柱，停泵；开启速度控制器，使高速逆流色谱仪的色谱分离柱正转，转速达 800 转/min 时，将溶解好的样品用注射器注入逆流色谱仪进样阀中，旋转进样阀为接柱状态，使样品进入色谱分离柱；设置流动相流速为 2.0 mL/min，开始泵送流动相，然后根据检测器紫外光谱图接收各组分，分离得到血根碱和白屈菜红碱。

6.如权利要求 1 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，上相中加入 10 mmol 三乙胺。

7.如权利要求 1 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，下相中加入 10 mmol 三氟乙酸。

8.如权利要求 5 所述的分离博落回中血根碱和白屈菜红碱的方法，其特征在于，所述逆流色谱仪液相分析条件：4.6 mm × 250 mm, 5 μmi.d.规格的 Waters SymmetryC18 色谱柱，流动相为乙腈/0.1%三乙胺水溶液、体积比为 35:75，磷酸调 pH 至 2.5，流速为 1.0mL/min，检测波长 254 nm。