[发明专利]一种具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法

权利要求书

1.一种具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)取澳洲坚果果仁，经烘干后进行冷榨脱脂，得到澳洲坚果粕，经乙醇充分浸提后，向浸提液中加入复合酶进行酶解，调节酶解的pH值为7 .5～8.0，酶解温度为45～50℃，酶解反应的时间为1 .5～2.0h；所述复合酶的组成按质量比计为：中性蛋白酶：碱性蛋白酶：木瓜蛋白酶＝2:1:1，复合酶用量为澳洲坚果粕质量的1～1 .5％；酶解完毕后进行灭酶处理，得到澳洲坚果酶解多肽液； (2)将步骤(1)所得酶解多肽液冷却至室温，离心后取上清液，调pH值至4 .6，静置30min后再次离心，收集上清液； (3)将步骤(2)收集的上清液装入透析袋中进行透析，透析两次后截留分子量为100～300Da的透析液，经冷冻干燥后，即得澳洲坚果抗菌活性多肽。

2.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述乙醇浸提的步骤为：将澳洲坚果粕粉碎，过60目筛，然后向其中加入体积分数60％的乙醇溶液，充分混匀后置于恒温水浴中浸提1h，然后加热煮沸至无乙醇味。

3.根据权利要求2所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述恒温水浴的温度为55～60℃，待煮沸除去乙醇后，冷却至酶解所需温度。

4.根据权利要求2所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述澳洲坚果粕与乙醇溶液的料液比为1:5g/mL。

5.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述冷榨脱脂的操作为：将澳洲坚果果仁在20～25℃、压力45～55MPa下压榨50～60min。

6.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述灭酶处理的条件为：加热酶解液至85℃以上灭酶5～10min。

7.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述两次离心的条件均为：于4000r/min离心10min。

8.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述透析时，将第一次透析后的袋外液体通过旋转蒸发仪富集，温度为54℃，真空泵压力为90bar，转速为140r/min。

9.根据权利要求1所述的具有抗菌活性澳洲坚果多肽的制备方法，其特征在于，所述透析袋使用前经过煮沸处理10min。