[发明专利]一种全封闭一体化试剂提取扩增方法有效
申请号: | 201810610529.3 | 申请日: | 2018-06-12 |
公开(公告)号: | CN108913530B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
发明(设计)人: | 陈华云;刘淑园;杜逸穹;张天海 | 申请(专利权)人: | 广州和实生物技术有限公司 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12M1/38;C12Q1/6806;C12Q1/686 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋静娜;郝传鑫 |
地址: | 510535 广东省广州市高新技术*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 封闭 一体化 试剂 提取 扩增 方法 | ||
1.一种全封闭一体化试剂提取扩增方法,所述试剂提取扩增方法在试剂提取扩增装置中进行;所述试剂提取扩增装置包括提取仓、驱动机构和扩增管,所述提取仓包括按照样本流向依次分布的裂解机构、洗涤机构和洗脱机构;所述裂解机构内设有裂解试剂和磁性物质,所述洗涤机构内设有洗涤液,所述洗脱机构内设有洗脱液;相邻机构之间设有可活动的隔断;所述驱动机构包括可按照样本流向滑移的滑块,所述滑块上设有磁铁;所述扩增管位于所述洗脱机构下游,且与所述洗脱机构连通;所述磁铁为电磁铁;所述滑块在滑移过程中通过磁铁带动磁性物质移动;其中,所述试剂提取扩增方法包括:
步骤S1:将样本加入所述裂解机构,样本在裂解试剂中裂解,释放核酸;核酸跟磁性物质结合在一起;
步骤S2:所述滑块向所述扩增管方向移动,隔断失效,磁性物质流入所述洗涤机构;磁性物质均匀扩散到洗涤液中;磁性物质上的杂质被洗掉,并转移到洗涤液中;
步骤S3:所述滑块继续移动,隔断失效,磁性物质流入所述洗脱机构;磁性物质均匀扩散到洗脱液中;磁性物质上的核酸被洗掉,并转移到洗脱液中;
步骤S4:带有核酸的洗脱液流入所述扩增管,并在所述扩增管内进行PCR扩增;
其中,所述洗涤机构包括第一油槽和洗涤槽,所述洗涤槽内设有洗涤液;所述第一油槽位于所述裂解机构和所述洗涤槽之间;
所述洗脱机构包括第二油槽和洗脱槽,所述洗脱槽内设有洗脱液;所述第二油槽位于所述洗涤槽和所述洗脱槽之间;所述第一油槽和所述第二油槽内均设有油相;相邻两槽之间设有可活动的隔断;所述裂解机构与所述第一油槽之间设有可活动的隔断;所述扩增管与所述洗脱槽相连;
所述裂解机构包括按照样本流向依次分布的磁性槽、裂解槽和结合槽;所述裂解机构内,相邻两槽之间设有可活动的隔断;所述结合槽与所述第一油槽之间设有可活动的隔断;
所述提取仓进一步包括缓冲液槽,所述缓冲液槽位于所述洗脱槽下游,且与所述洗脱槽之间设有可活动的隔断;所述缓冲液槽位于所述扩增管上游,且与所述扩增管相通。
2.如权利要求1所述的试剂提取扩增方法,其中,所述裂解机构进一步包括位于所述磁性槽上游的样本槽,样本位于所述样本槽中;所述裂解试剂包括裂解增强剂和裂解结合液,分别设于所述裂解槽和所述结合槽内;所述磁性物质设于所述磁性槽内。
3.如权利要求2所述的试剂提取扩增方法,其中,所述步骤S2中,所述滑块从所述第一油槽滑向所述洗涤槽时,所述第一油槽和所述洗涤槽之间的隔断暂时失效,磁性物质流入所述洗涤槽;当所述滑块通过所述第一油槽与所述洗涤槽之间的隔断后,该隔断恢复,继续隔开所述第一油槽与所述洗涤槽。
4.如权利要求1所述的试剂提取扩增方法,其中,所述步骤S3中,所述滑块从所述第二油槽滑向所述洗脱槽时,所述第二油槽与所述洗脱槽之间的隔断暂时失效,磁性物质流入所述洗脱槽;当所述滑块通过所述第二油槽与所述洗脱槽之间的隔断后,该隔断恢复,继续隔开所述第二油槽与所述洗脱槽。
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