[发明专利]一种高载量的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法

说明书

一种高载量的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法，本发明通过加入低成本的试剂乙二胺作为“催化剂”，能克服环氧基与蛋白A反应活性不高的缺点，实现蛋白A在环氧基载体上的固定。通过采用这种制备方法，能有效提高蛋白A在环氧基载体上的偶联率，而且制备得到的蛋白A免疫吸附材料对血浆中抗体的吸附量高，这种高吸附性能对蛋白A免疫吸附疗法的广泛应用至为关键。本发明中制备的蛋白A免疫吸附材料对抗体的吸附量大，高于传统方法制备得到的蛋白A免疫吸附材料，提高了临床治疗效果、安全性和可靠性。

技术领域

本发明属于医用生物材料，具体涉及一种高载量的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法。

背景技术

各种自身免疫性疾病和器官移植排斥反应都是由于人体内产生自身抗体，对抗自身组织器官或移植器官，引起组织器官的损害而导致的一系列疾病，是目前国内外医学界面临的治疗难题之一。自身免疫性疾病是由于人体免疫系统发生紊乱而导致，具有相当高的致残率或病死率，常见的有系统性红斑狼疮(SLE)、血友病、类风湿关节炎(RA)、系统性硬化(SSc)、重症肌无力(MG)、干燥综合征(SS)等。移植排斥反应是器官移植失败的主要原因，这涉及到病人机体对移植的异源器官所产生的免疫不耐受，进而促使供体特异性抗体的产生。针对这类急危重症，传统的药物和手术治疗无能为力，而免疫吸附疗法通过选择性清除患者血液中致病性抗体，具有其独特的疗效，已成为近年来国内外的推荐疗法。

免疫吸附疗法利用亲和层析的原理，直接从患者血液中选择性或特异性地清除致病因子，从而达到净化血液，治疗疾病的目的。蛋白A是一种从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)提取出来的单链蛋白质，它对IgG抗体的C2-C3区域具有高度的选择性和亲和性。蛋白A的N端含有5个组成高度类似的IgG结合区：E、D、A、B、C，这五个结合区分别都能与IgG抗体的Fc段结合，且吸附能力相近。将蛋白A偶联到凝胶载体上，当患者的血液经过该吸附材料时，一些因抗体质与量的改变而导致的疾病就可得到缓解或治愈。临床应用结果表明，蛋白A免疫吸附治疗对自身免疫性疾病、器官移植排斥反应等具有很好的治疗效果。

目前，关于蛋白A免疫吸附材料合成方法的专利很多(CN1367181A，CN1365853A，CN101190409A，CN101185878A)，但利用环氧基载体固定蛋白A的专利很少，这是因为载体上的环氧基团的活性不高，与蛋白A上的伯氨基很难发生反应，因而蛋白A在这些载体上的偶联率非常低，甚至不能偶联在载体上。通过采取增加分子间隔臂臂长的方法，对增加蛋白A在环氧基载体上的偶联率有一定的帮助，如专利CN101069751A和CN107754764A。但这些方法需要使用缩水甘油醚增加分子间隔臂的长度，由于缩水甘油醚成本较高，限制了蛋白A免疫吸附的进一步推广。

环氧基与蛋白A反应后键接牢固，蛋白A不易脱落，适用于临床用蛋白A免疫吸附材料的制备。本发明通过加入便宜的试剂乙二胺作为“催化剂”，能克服环氧基与蛋白A反应活性不高的缺点，实现蛋白A在环氧基载体上的固定。通过采用这种制备方法，能有效提高蛋白A在环氧基载体上的偶联率至90％，而且制备得到的蛋白A免疫吸附材料对血浆中抗体的吸附量最高可达到56mg/g，这种高吸附性能对蛋白A免疫吸附疗法的广泛应用至为关键。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种环氧基载体的蛋白A免疫吸附材料。此外本发明还提供该蛋白A免疫吸附材料的制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下方案实现：

一种蛋白A免疫吸附材料，其特征在于，具有如下化学结构：

其中，亲水性凝胶微球；SPA为蛋白A。

所述蛋白A免疫吸附材料中，偶联在凝胶微球上的蛋白A含量为：3.5-12mg/g。本发明制备得到的蛋白A免疫吸附材料对人血浆中抗体的吸附量为每毫升填料吸附30～64mg。

上述蛋白A免疫吸附材料的制备方法，包括以下步骤：