[发明专利]一种高载量的蛋白A免疫吸附材料及其制备方法有效
申请号: | 201810610034.0 | 申请日: | 2018-06-13 |
公开(公告)号: | CN108816208B | 公开(公告)日: | 2022-03-01 |
发明(设计)人: | 张旭锋;杨家梅;杨海艳;郭仁玲 | 申请(专利权)人: | 云南师范大学 |
主分类号: | B01J20/28 | 分类号: | B01J20/28;B01J20/30;B01J20/24;A61M1/36 |
代理公司: | 广州润禾知识产权代理事务所(普通合伙) 44446 | 代理人: | 周郑奇;林名钦 |
地址: | 650500 云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高载量 蛋白 免疫 吸附 材料 及其 制备 方法 | ||
1.一种蛋白A免疫吸附材料的制备方法,其特征在于,所述蛋白A免疫吸附材料具有如下化学结构:
其中,亲水性凝胶微球;SPA为蛋白A;
所述蛋白A免疫吸附材料的制备方法包括以下步骤:
S1:制备环氧基载体;
S2:将环氧基载体与蛋白A、乙二胺溶液混合反应,得反应液;
S3:用封端试剂与步骤S2所得产物的残余环氧基反应封端,得到蛋白A免疫吸附材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中,将环氧基载体与蛋白A溶液以及浓度为0.02~0.1M的乙二胺,在pH为8~10,温度为5~30℃条件下反应10~48小时。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中,三种物质的配比为,1g环氧基载体:4~16mg蛋白A:1.5~6mL乙二胺溶液。
4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中,环氧基载体由琼脂糖凝胶微球或纤维素微球制得。
5.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述环氧基载体的制备方法包括:用琼脂糖凝胶微球或纤维素微球加入NaOH溶液、硼氢化钠以及环氧氯丙烷置于恒温摇床中,在30℃~50℃反应3~5小时后,用蒸馏水冲洗,得到环氧基载体。
6.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述步骤S3中,将步骤S2中所得产物依次用0.5~1.5M的NaCl水溶液和蒸馏水冲洗后,加入0.1~2M的封端试剂溶液中,调节pH至8~10,在20~40℃反应6~12小时与残余的环氧基反应封端,用水冲洗、抽干,得到蛋白A免疫吸附材料。
7.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤S3中的封端试剂为乙醇胺、巯基乙醇或甘氨酸。
8.一种如权利要求1~7任一项所述方法制备的蛋白A免疫吸附材料。
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