[发明专利]一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺

权利要求书

1.一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，挑选出无霉变、无斑点、病虫害的朝鲜蓟叶，随后置于烘干箱中进行干燥，干燥温度为45-55℃，干燥时间25-35min，再将温度升至55-65℃，继续干燥15-25min，随后置于粉碎机中进行粉碎，粉碎至10-100目，备用；

步骤二，向步骤一备用的朝鲜蓟粉中按料液比1:(30-40)加入PH为4.5的缓冲液，随后送入水浴锅中水浴预热15-25min，水浴温度为45-55℃，随后再加入复合酶，水浴温度升至55-65℃，酶解4-10h，随后再置于微波提取设备中，微波功率450-550W，提取时间为15-25min，随后置于离心机中进行离心，离心转速为6500-7500r/min，离心10min，去除上清液，随后将提取液进行冷冻干燥，得到洋蓟素粗品；

步骤三，将步骤二得到的洋蓟素粗品溶于体积分数为80％的乙醇溶液中，随后进行离心，取上清液，将上清液置于分液漏斗中，随后加入等体积的萃取液，振荡摇匀，静置分层，收集萃取液层，将水层继续加入等体积的萃取液，继续振荡摇匀，萃取1-3次，合并萃取液，随后进行浓缩蒸干，备用；

步骤四，将硅胶预处理，再干法装入层析柱中，压紧，随后加入步骤三备用的洋蓟素样品，且洋蓟素样品在柱的上方，随后用洗脱剂进行梯度洗脱，采用薄层色谱跟踪分析至洗脱完全，随后再进行分段收集含有洋蓟素的洗脱液，低温、减压浓缩至干即得洋蓟素。

2.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤二中料液比为1:35，所述缓冲液为盐酸、蒸馏水调配的溶液。

3.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤二中复合酶为纤维素酶、果胶酶，其中纤维素酶、果胶酶物质的质量比为1:(2-5)。

4.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤三中萃取液为甲酸乙酯、正丁醚、异丙醇按照重量比(5-9):(1-3):1组成的混合物。

5.根据权利要求4所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤三中萃取液为甲酸乙酯、正丁醚、异丙醇按照重量比7:2:1组成的混合物。

6.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤四中硅胶预处理为将硅胶于105-115℃下进行活化2h，随后冷却至室温。

7.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤四中洋蓟素样品采用洗脱剂溶解再加入到层析柱中，且洋蓟素样品、硅胶物质的质量比为1:6。

8.根据权利要求1所述的一种朝鲜蓟中洋蓟素的提纯工艺，其特征在于，所述步骤四中洗脱剂为丙酮、乙酸乙酯的混合物；所述梯度洗脱为丙酮、乙酸乙酯的体积比为5:1至体积比为15:1进行梯度洗脱。