[发明专利]一种用于诊断脑梗塞的肠道菌群试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201810607301.9 | 申请日： | 2018-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN108841972A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 朱彧;岳伟;相蕾;阚鹏程;程乾胜;杨萍 | 申请（专利权）人： | 天津市环湖医院(天津市神经外科研究所天津市脑系科中心医院) |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6869;C12Q1/10;C12Q1/06;C12R1/185 |
| 代理公司： | 天津展誉专利代理有限公司 12221 | 代理人： | 陈欣 |
| 地址： | 300000*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脑梗塞 肠道菌群 载体质粒 试剂盒 诊断 临床医疗领域 第二试剂 第一试剂 患者肠道 菌群结构 社会意义 水溶 引物 代谢 应用 转入 标本 基因 预防 探索 | ||
1.一种用于诊断脑梗塞的肠道菌群试剂盒，其特征在于，包括依次设置的如下试剂：
第一试剂为基因序列为5’-AGAGTTTGATCATGGCTC-3’和5’-CCGTCAATTCCTTTGAGTTT-3’的水溶引物；
第二试剂为pGEM-T easy载体质粒。
2.一种用于诊断脑梗塞的肠道菌群试剂盒应用，其特征在于：
a.将粪便标本的基因组DNA为模板，加入第一试剂为基因序列为5’-AGAGTTTGATCATGGCTC-3’和5’-CCGTCAATTCCTTTGAGTTT-3’的水溶引物中，以High-Fidelity PCR Master Mix with GC Buffer和高效高保真酶进行PCR扩增；
b.将PCR产物加入第二试剂载体质粒pGEM-T easy，使其连接，转染；
c.将连接，转染后产物，转入DH5α感受态细胞，并进行测序，测序结果使用GenBank的BLAST和RDP数据库进行比对,得到各微生物相对丰度，进行分析。
d.纲：gammaproteobacteria相对丰度高于23％；
科：enterobacteriaceae相对丰度高于22％；
目：enterobacteriales相对丰度高于22％；
属：escherichia_shigella:相对丰度高于20％可判断粪便样本与脑梗死患者有相关性。
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