[发明专利]柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测试剂盒和方法在审
| 申请号： | 201810596969.8 | 申请日： | 2018-06-11 |
| 公开（公告）号： | CN108441582A | 公开（公告）日： | 2018-08-24 |
| 发明（设计）人： | 曹孟籍;李敏;李中安 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12R1/94 |
| 代理公司： | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人： | 邹晓艳 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鳞皮 柑橘 试剂盒 病毒 总RNA 扩增 引物 | ||
1.一种柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：包括外引物对F3-5/B3-5和内引物对FIP3-5/BIP3-5，所述内、外引物对的序列为：
F3-5:5’-CTTTGAGTCCATCAACTGTT-3’，
B3-5:5’-TCACTCTGAAGCTGACAT-3’，
FIP-5:5’-GGTGAAGGACCAACTAGGACGTTGCTGAAATCTGCCTC-3’，
BIP-5:5’-GAAACCCCTTGTTCTTGTCGGGTGCTATAATTTACAGCCTCA-3’。
2.如权利要求1所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测试剂盒，其特征在于：还包括LAMP Kit。
3.一种柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：包括如下步骤：提取待测样品的总RNA，以总RNA为模板，利用权利要求1或2所述的试剂盒进行RT-LAMP扩增，扩增条件为：58～68℃扩增40～80min，对扩增产物进行鉴定。
4.如权利要求3所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：所述扩增产物进行鉴定的方法为凝胶电泳成像和紫外成像。
5.如权利要求3所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：所述扩增条件为：60℃扩增60min。
6.如权利要求3或4或5所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：所述内引物、外引物的浓度比为2～12：1。
7.如权利要求6所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：所述内引物、外引物的浓度比为8：1。
8.如权利要求7所述的柑橘鳞皮病毒的RT-LAMP检测方法，其特征在于：反应体系为：WarmStartLAMP 2×Mix 12.5μL、10μmol/L的F3/B3 0.5μL、10μmol/L的FIP/BIP 4μL、RNA 2μL加水补足至25μL。
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