[发明专利]鹧鸪早期性别PCR鉴定试剂盒、应用及方法在审
| 申请号： | 201810580643.6 | 申请日： | 2018-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN108707654A | 公开（公告）日： | 2018-10-26 |
| 发明（设计）人： | 尹兆正;温娅娅;毛海光;董信阳;曹海月;刘虹华;刘珂 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6879 | 分类号： | C12Q1/6879;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 冷红梅 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 早期性别鉴定 动物伤害 分子手段 腹腔镜检 良种选育 上游引物 下游引物 产业化 类固醇 粪便 应用 鉴别 检测 | ||
【权利要求书】：
1.一种鹧鸪早期性别PCR鉴定试剂盒，主要包括PCR扩增引物和PCR反应试剂，其特征在于，所述PCR扩增引物序列如下：
上游引物：5'-GTTACTGATTCGTCTACGAGA-3'
下游引物：5'-ATTGAAATGATCCAGTGCTTG-3'。
2.权利要求1所述试剂盒在鹧鸪早期性别鉴定中的应用。
3.利用权利要求1所述试剂盒对鹧鸪进行早期性别鉴定的方法，所述方法包括：
(1)提取初生鹧鸪羽毛DNA；
(2)以提取获得的DNA为模板，采用PCR扩增引物进行PCR扩增；
所述PCR扩增引物序列如下：
上游引物：5'-GTTACTGATTCGTCTACGAGA-3'；
下游引物：5'-ATTGAAATGATCCAGTGCTTG-3'；
(3)PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，若仅扩增获得1条566bp的特异性条带，则判断为雄性鹧鸪；若扩增获得566bp和416bp的2条特异性条带，则判断为雌性鹧鸪。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于PCR反应程序如下：98℃预变性2min；98℃变性10S，53.1℃退火30S，72℃延伸30S，共30个循环；72℃延伸2min；4℃保存。
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