[发明专利]一种天花粉或含天花粉为原料制备的药物的检测方法

说明书

本发明提供了一种天花粉或含天花粉为原料制备的药物的检测方法。本发明还提供了一种鉴别天花粉或含天花粉为原料制备的药物的方法。本发明采用HPLC对23批天花粉标准汤剂、天花粉药材、天花粉饮片、3批天花粉配方颗粒及各生产工序样品进行了特征图谱研究，得到4个分离度、重复性均较好的特征图谱，为天花粉从药材、饮片到配方颗粒及配方颗粒各生产工序的全面质量控制提供了一定的依据。

技术领域

本发明涉及一种天花粉或含天花粉为原料制备的药物的检测方法。

背景技术

天花粉是历史悠久、使用广泛的中药，具有清热生津、排脓消肿的功效。天花粉蛋白具有引产、抗肿瘤的功效。2005年版《中华人民共和国药典(一部)》收载的天花粉为葫芦科植物栝楼Tri-chosanthes kirilowii Maxim.或双边栝楼Trichosanthes Uniflora Hao的干燥根，主产于河南、山东、江苏、贵州、安徽等地。目前全国各地所用天花粉的原植物很多，不同植物来源的天花粉的疗效不完全一样，某些伪品还有一定的不良反应。

目前报道的天花粉的检测方法较多，如鲁建江，天花粉多糖的提取及含量测定，天津药学，2001年4月第13卷第2期，从天花粉中提取多糖并测定其含量。方法:用水提醇沉法提取天花粉多糖,用酚-硫酸比色法测定多糖含量。该实验证明天花粉多糖含量不是很高,提取方法有待进一步改进。彭朝霞，HPLC测定天花粉中葫芦素B的含量，中国现代应用药学杂志2009年11月第26卷第11期，由于葫芦素B具有较大毒性，其毒性反应是与其剂量密切相关的。该文献公开了检测天花粉中葫芦素B的方法，有文献报道采用氨基酸作为天花粉中的检测指标，如：曹敏，等，薄层色谱法鉴别天花粉及其相似品的氨基酸，传统医药，正品天花粉在瓜氨酸和丙氨酸对照品色谱相应结果位置上显相同的紫红色斑点，大苞栝楼的根则在丙氨酸对照品色谱处无相应斑点。杨玉琴，等，不同产地天花粉药材中瓜氨酸的含量，时珍国医国药2009年第20卷第6期，对15个不同产地的天花粉药材进行瓜氨酸含量测定,在含量上有一定差异,但贵州天花粉中瓜氨酸含量较高,且生长周期越长瓜氨酸含量就越高。

天花粉中含有较多的氨基酸成分，已有检测方法的有瓜氨酸、γ-氨基丁酸(刘文，天花粉中瓜氨酸与γ-氨基丁酸的含量测定)，采用柱前衍生反相高效色谱峰进行检测，样品处理过程较复杂。此外，色氨酸也是植物体内生长素生物合成重要前体物质，在高等植物中普遍存在，同时，色氨酸被广泛应用于饲料中(宋吉英，HPLC法测定玉米蛋白粉和乳猪教槽料中色氨酸的含量)采用0.0085mol/L乙酸钠：甲醇(95:5)。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种天花粉或含天花粉为原料制备的药物的检测方法。本发明还提供了一种鉴别天花粉或含天花粉为原料制备的药物的方法。

本发明提供了一种天花粉或含天花粉为原料制备的药物的检测方法，它是采用HPLC指谱图谱检测，其操作步骤如下：

a、供试品溶液的制备：

取待检样品，加入10-50份体积重量比的稀乙醇，回流或超声处理20min-40min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

b、参照物溶液的制备：

取色氨酸对照品适量，精密称定，加稀乙醇溶液，即得；

c、分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液注入液相色谱仪，以乙腈、水为流动相进行洗脱，其色谱条件为：

以氨基键合硅胶为填充剂(Agilent Polaris 5NH₂ 250×4.6mm)；以水为流动相A，以乙腈为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为每分钟0.8-1.2ml；检测波长：224-300nm，柱温25-35℃。理论板数按色氨酸峰计算应不低于3000；

其中，所述的药物包括天花粉药材、饮片、标准汤剂、天花粉配方颗粒。