[发明专利]一种多肽纳米泡及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201810573628.9 | 申请日： | 2018-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN108721633B | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 张亚琴;韩晓;吴金道;袁毅;庞晶;许茹凤;李宏卫;武和明;浦立勇 | 申请（专利权）人： | 南京医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A61K47/42;A61K9/50;A61K45/00;A61P3/04 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 211166 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 多肽 纳米 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种多肽纳米泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建重组质粒，所述重组质粒包括Flag标签、脂肪组织靶向性多肽和微泡标志性膜蛋白CD63的编码基因，Flag标签和脂肪组织靶向性多肽的编码基因按顺序依次连接在微泡标志性膜蛋白CD63编码基因的起始密码子后；其中所述脂肪组织靶向性多肽的氨基酸序列为CKGGRAKDC；所述构建步骤为：以CD63的cDNA为模板，以CD63-F/CD63-R为引物，经PCR扩增得到Flag-peptide-CD63片段，将Flag-peptide-CD63片段插入出发质粒pIRES2-EGFP的XhoI、EcoRI酶切位点之间得到重组质粒；其中引物CD63-F的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，引物CD63-R的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；
(2)将步骤(1)得到的重组质粒通过脂质体转染到分泌纳米泡的细胞中培养，收集细胞培养液，经超速离心提取多肽纳米泡。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述分泌纳米泡的细胞为未成熟的树状细胞或间充质干细胞。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述分泌纳米泡的细胞为293T细胞。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述超速离心的步骤如下：细胞培养液经500-1000g，2-4℃，离心10-30min后取第一次上清；第一次上清经1500-3000g，2-4℃，离心20-30min后取第二次上清；第二次上清经2-4℃，100,000-160,000g，离心1-2h后得到沉淀，即为多肽纳米泡。
5.权利要求1-4任意一项所述制备方法制备得到的多肽纳米泡。
6.权利要求5所述的多肽纳米泡作为药物载体在制备治疗肥胖药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗肥胖药物为核酸类药物、蛋白类药物、脂类药物、糖类药物或酮类药物。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述酮类药物为姜黄素。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京医科大学，未经南京医科大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810573628.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
