[发明专利]一种用于体外培养星形胶质细胞的培养基及培养方法有效
申请号: | 201810569605.0 | 申请日: | 2018-06-05 |
公开(公告)号: | CN108865997B | 公开(公告)日: | 2022-02-11 |
发明(设计)人: | 吴冈义;张靖宜;王今朝 | 申请(专利权)人: | 华南师范大学 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 胡辉 |
地址: | 510006 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 体外 培养 星形 胶质 细胞 培养基 方法 | ||
1.一种用于体外培养星形胶质细胞的培养基,其特征在于:所述培养基是在基础培养基的基础上添加表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、Smo蛋白激动剂Smoothened agonist和Hh激动剂Purmorphamine;
所述培养基中,表皮生长因子的浓度为5-200 ng/ml,成纤维细胞生长因子的浓度为5-200 ng/ml,Smo蛋白激动剂Smoothened agonist的浓度为0.05-1 m M,Hh激动剂Purmorphamine的浓度为0.05-1mM;
所述基础培养基中包含有下述组分:5%v/v胎牛血清,Gibco MEM无血清培养基GlutaMAX,1 M葡萄糖,50 g/L NaHCO3,1%v/v青霉素混合盘尼西林双抗。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述培养基中,表皮生长因子的浓度为10-20 ng/ml,成纤维细胞生长因子的浓度为10-20 ng/ml,Smo蛋白激动剂Smoothenedagonist的浓度为0.05-1 mM,Hh激动剂Purmorphamine的浓度为0.05-1mM。
3.一种用于体外培养星形胶质细胞的培养方法,其特征在于:利用权利要求1或2所述的培养基隔代替代基础培养基对星形胶质细胞进行体外培养。
4.根据权利要求3所述的培养方法,其特征在于:培养中每次传代时,用酶液对细胞消化2-5min后,震荡培养器皿,弃去溶液;然后再加入酶液消化得到星形胶质细胞进行传代。
5.根据权利要求4所述的培养方法,其特征在于:震荡时需剧烈震荡。
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