[发明专利]一种HPLC法分析及制备双乙酰科立内酯对映异构体的方法

权利要求书

1.一种HPLC法分析及制备双乙酰科立内酯对映异构体的方法，其特征在于，采用手性色谱柱并使用正相色谱法进行分析分离；所述的手性色谱柱为多糖衍生物涂覆型手性色谱柱，具体为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)或直链淀粉-三[(S)-α-甲基苯基氨基甲酸酯]；所述的正相色谱法所用的流动相为正己烷-乙醇混合溶剂；

所述的分析方法包括以下步骤：

(1).(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品分别用乙醇溶解，配置成浓度为0.1mg/mL的对照品溶液；

(2).(±)-双乙酰科立内酯供试品用乙醇溶解，配制成浓度为0.1～1mg/mL的供试品溶液，进样量为5～10μL；

(3).设置正己烷-乙醇混合溶剂的比例：当手性色谱柱填料为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，正己烷-乙醇混合溶剂的比例为95:5～60:40；当手性色谱柱填料为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三[(S)-α-甲基苯基氨基甲酸酯]，正己烷-乙醇混合溶剂的比例为90:10～65:35；设置流速为0.5～1.0mL/min；设置液相色谱柱温箱温度为20～40℃；检测波长为205nm；

(4).精密吸取(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品及(±)-双乙酰科立内酯供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品保留时间，完成对双乙酰科立内酯对映异构体的分析；

所述的制备方法包括以下步骤：

(1).(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品分别用乙醇溶解，配置成浓度为1mg/mL的对照品溶液；

(2).(±)-双乙酰科立内酯供试品用乙醇溶解，配制成浓度为5～10mg/mL的供试品溶液；进样量为1-10mL；

(3).设置正己烷-乙醇混合溶剂的比例：当手性色谱柱填料为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)，正己烷-乙醇混合溶剂的比例为95:5～80:20；当手性色谱柱填料为硅胶表面涂覆有直链淀粉-三[(S)-α-甲基苯基氨基甲酸酯]，正己烷-乙醇混合溶剂的比例为95:5～88:12；设置流速为5～50mL/min；检测波长为205nm；

(4).取(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品及(±)-双乙酰科立内酯供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照(+)-双乙酰科立内酯和(-)-双乙酰科立内酯对照品保留时间，分别接收对应主峰，浓缩，干燥，完成对(-)-双乙酰科立内酯及其对映异构体的制备。