[发明专利]一种具有高抗氧化能力的啤酒酵母菌株

说明书

本发明公开了一种具高抗氧化能力的啤酒酵母菌株，属于生物工程领域。本发明提供的啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus)已于2018年3月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CMCC No.15504，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。该菌株具有较好的生产稳定性，可用于啤酒生产。

技术领域

本发明涉及一种具高抗氧化能力的啤酒酵母菌株，属于生物工程领域。

背景技术

酵母是一种重要的工业生产菌株，它具有发酵速度快、生长周期短、可进行大规模培养等优点。酵母在工业生产中会受到各种胁迫压力(如氧化胁迫、高渗透压胁迫、低pH值、高酒精度胁迫、冷或热刺激、饥饿、高浓度SO₂等)的影响，这些胁迫对酵母的生存能力和发酵效力有很大的影响。其中，氧化胁迫是对酵母发酵过程影响最大的胁迫，它主要是由活性氧簇(ROS)的大量积累引起的。ROS是细胞新陈代谢的主要副产物，它包括过氧化氢、单态氧、羟自由基和超氧化物阴离子等。由于ROS和ATP参与氧化磷酸化过程，这两者在细胞内的存在是必要的。但是，当ROS随时间增加在细胞内累积过多，细胞自身清除内源性ROS的机制已不能将过多的ROS抵消掉，ROS的大量积累损伤胞内大分子物质，使得细胞膜传输、细胞代谢等功能减弱，啤酒酵母的生物活性和发酵能力都会受到严重的影响。

ROS诱发的损伤是复杂的并且通常情况下是不可逆转的。尤其是胞内ROS会直接损害线粒体功能，使得线粒体向着更易于产生ROS的方向变化。线粒体与ROS之间恶性循环更加快了细胞老化的速率。ROS的聚集和细胞氧化压力的增加被认定为细胞衰老的重要特征，因此，提高酵母的抗氧化能力有对提高酵母的发酵性能有重要的意义。

发明内容

本发明用不同浓度的H₂O₂刺激酵母细胞，在致死浓度条件下以96孔板微型液体培养方法筛选生长速度快、活性高的菌株。然后利用含有不同浓度的H₂O₂的96孔板微型液体培养方法驯养筛选得到的菌株，最终得到一株抗氧化能力提高的啤酒酵母(Saccharomycespastorianus)。

本发明所述啤酒酵母(S.pastorianus)，已于2018年3月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CMCC No.15504，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明提供的啤酒酵母(S.pastorianus)的培养方法是将啤酒酵母接种至YPD液体培养基中培养。所述YPD培养基为：酵母粉10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，pH自然，蒸馏水配置，115℃灭菌15min。

本发明提供的啤酒酵母(S.pastorianus)，相较于出发菌株Pilsner酵母，培养到第五天时胞内ROS积累量下降36.4％，传代第5代时胞内ROS含量减少6.5％，传代第5代时胞内ATP含量增加11.9％，传代第5代细胞存活率增加1.6％。可见，本发明提供的啤酒酵母具有更强的抗氧化能力，能够显著避免由于ROS的大量积累所导致的细胞膜传输减弱、细胞代谢减弱等问题，提升啤酒酵母的生物活性和发酵能力。

生物材料保藏

啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus)，已于2018年3月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CMCC No.15504，保藏地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

附图说明

图1为不同浓度过氧化氢下啤酒酵母的死亡率。

图2为胞内ROS在菌株各生长时期的含量。