[发明专利]西红花的组织培养法

说明书

本发明公开了一种西红花的组织培养法，包括以下步骤：掰下西红花球茎的侧芽进行冲洗、消毒、切割，然后横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养，直至形成簇状生长的愈伤组织；将愈伤组织分割成小块后接种到诱导不定芽培养基上进行培养，直至长出不定芽；割取不定芽接种到球茎诱导培养基中，从而获得小球茎Ⅰ；再将小球茎Ⅰ接种到壮苗培养基上进行壮苗培养，得可出瓶种植进行移栽的小球茎Ⅱ。采用该方法能获得大量的西红花组培种苗。

技术领域

本发明涉及西红花的组织培养法，特别是一种西红花的组织培养快速繁殖方法。

背景技术

西红花，因为它的柱头可以用作香料和药物治疗疾病而广泛种植，同时可以广泛应用于制药、食品加工和着色等行业。然而，西红花的花不育，不能产生有活力的种子。传统的繁殖体系，如通过分球繁殖速度缓慢，且导致病毒的积累，影响西红花的品质，因此期待通过组织培养繁殖从而提供了一种潜在而有效的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种西红花的组织培养法，采用该方法能获得大量的西红花组培种苗。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种西红花的组织培养法(西红花的组织培养快速繁殖方法)，包括以下步骤：

1)、取生长健壮且无病虫害的西红花球茎，掰下侧芽(长度约1～2cm)后流水冲洗；

2)、愈伤组织的诱导：

将上述流水冲洗后的西红花球茎侧芽经消毒(常规消毒)后，切割成长度为3～5mm，横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养，直至形成簇状生长的愈伤组织；

培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmol m^-2·s^-1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；

3)、不定芽诱导：

将步骤2)所得的愈伤组织分割成长度为0.5～1cm的小块；将小块愈伤组织接种到诱导不定芽培养基上进行培养，直至小块愈伤组织长出0.6～1.1cm的不定芽；

培养条件为：16小时光照，光照强度30～40μmol m^-2·s^-1，温度为25±1℃；8小时暗培养，温度为21±1℃；上述光照和暗培养交替进行；

4)、小球茎培养：

割取步骤3)所得的不定芽作为单株小苗，将此小苗接种到球茎诱导培养基中，从而使其进一步发育成至少有一条长度≥0.9cm根的小球茎Ⅰ；

培养条件为：16小时光照，光照强度40～50μmol m^-2·s^-1，温度为22～26℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行；

5)、壮苗培养：

将上述小球茎Ⅰ接种到壮苗培养基上进行壮苗培养，培养条件为：16小时光照，光照强度40～50μmol m^-2·s^-1，温度为22～26℃；8小时暗培养，温度为20～22℃；上述光照和暗培养交替进行，直至获得至少有2条长度≥0.9cm根的小球茎Ⅱ。

注：此小球茎Ⅱ直径约2cm，根的数量一般为2～3根；此小球茎Ⅱ可出瓶种植进行移栽。

作为本发明的西红花的组织培养法的改进，步骤2)的愈伤组织诱导培养基：MS+6-BA5～10mg/L+NAA1～2mg/L+白砂糖20～30g/L+琼脂7～9g/L，pH为5.5～6.0。