[发明专利]西红花的组织培养法有效
申请号: | 201810552491.9 | 申请日: | 2018-05-31 |
公开(公告)号: | CN108419679B | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 毛碧增;马阳阳;何伯伟 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红花 组织培养 | ||
1.西红花的组织培养法,其特征是包括以下步骤:
1)、取生长健壮且无病虫害的西红花球茎,掰下侧芽后流水冲洗;
2)、愈伤组织的诱导:
将上述流水冲洗后的西红花球茎侧芽经消毒后,切割成长度为3~5mm,横放接种到愈伤组织诱导培养基上进行培养,直至形成簇状生长的愈伤组织;
培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m-2·s-1,温度为25±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;
愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA10mg/L+NAA2mg/L+白砂糖20~30g/L+琼脂7~9g/L,pH为5.5~6.0;
3)、不定芽诱导:
将步骤2)所得的愈伤组织分割成长度为0.5~1cm的小块;将小块愈伤组织接种到诱导不定芽培养基上进行培养,直至小块愈伤组织长出0.6~1.1cm的不定芽;
培养条件为:16小时光照,光照强度30~40μmol m-2·s-1,温度为25±1℃;8小时暗培养,温度为21±1℃;上述光照和暗培养交替进行;
不定芽诱导培养基:MS+TDZ1mg/L+PIC2mg/L+白砂糖20~30g/L+琼脂7~9g/L,pH为5.5~6.0;
4)、小球茎培养:
割取步骤3)所得的不定芽作为单株小苗,将此小苗接种到球茎诱导培养基中,从而使其进一步发育成至少有一条长度≥0.9cm根的小球茎Ⅰ;
培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m-2·s-1,温度为22~26℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行;
球茎诱导培养基:MS+NAA1mg/L+白砂糖20~30g/L+琼脂7~9g/L,pH为5.5~6.0;
5)、壮苗培养:
将上述小球茎Ⅰ接种到壮苗培养基上进行壮苗培养,培养条件为:16小时光照,光照强度40~50μmol m-2·s-1,温度为22~26℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行,直至获得至少有2条长度≥0.9cm根的小球茎Ⅱ;
壮苗培养基:1/2MS基本培养基+1mg/LNAA+白砂糖15~30g/L+琼脂7~9g/L,pH为5.5~5.8。
2.根据权利要求1所述的西红花的组织培养法,其特征是:所述步骤1)为:先将侧芽放入质量浓度为0.8~1.2%的洗衣粉水溶液中浸泡20~40min,然后再将侧芽放入纱袋中用自来水冲洗1~2小时。
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