[发明专利]促根抗盐的碳氮磷协同菌群的筛选及协同菌剂的制备与应用

说明书

一种促根抗盐的碳氮磷协同菌群的筛选及协同菌剂的制备与应用，属于环境生物技术领域，本方法首先将采集到的盐碱地野生植物的根系样品用活性保持型缓冲液进行清洗得到根系微生物样品悬浮液，然后将根系微生物样品悬浮液采用离心沉淀和微孔膜截留联合法收集根际微生物样品并制成固态微生物接种原料；接着利用专化高盐缺碳液体培养基及生物活性和惰性碳源，筛选出固态微生物接种原料中的异效碳源利用型协同抗盐菌群；进一步利用专化溶磷缺氮液体培养基，筛选出异效碳源利用型协同抗盐菌群中的耐盐的碳氮磷协同菌群；将耐盐的碳氮磷协同菌群与微生物活性保持载体混合，制备出可促根抗盐的碳氮磷协同菌群固态制剂。促进作物根系的抗盐性并改善其生长。

技术领域

本发明属于环境生物技术领域，具体涉及一种促根抗盐的碳氮磷协同菌群的筛选及协同菌剂的制备与应用。

背景技术

目前，我国盐渍化土地的面积高达1.8亿亩，且呈逐年递增的趋势。以设施蔬菜土壤为例，其表层土壤中盐分的含量是露地的7.9倍，设施菜田土壤盐分的总量上升了69.3%。土壤盐化已严重阻碍了作物的生长和种植业的可持续发展。因此，如何提高作物耐盐性是促进我国种植业良性发展的面临的重要问题之一。

淡水资源短缺是限制我国农业发展的一个重要因素。特别是黄淮海流域，水资源仅占全国8%，而耕地占40%，农业用水极度缺乏。为了缓解淡水资源危机，被动采用咸水灌溉已成为黄淮海流域多数地区不可避免的现实问题。但是，持续微咸水灌溉极易导致次生盐渍化和作物减产。因此，如果在微咸水灌溉区域提高作物耐盐性也是亟待解决的重要问题之一。

在盐分累积下，一方面，土壤中的养分，特别是氮和磷，往往处于失效状态而难以被作物根系吸收利用；另一方面，盐分占比增大而碳库占比下降，表现出明显的高盐低碳趋势。土壤碳库，特别是有机碳，不仅是土壤有机质的重要表征，而且是微生物发挥其功能的重要调节者；而有机质和微生物对调控作物生长有十分重要的作用。因此，提升土壤碳库占比是阻控盐渍化需首要解决的问题。其次，利用根际微生物与根系的协同促生效果，不仅可以通过活化土壤养分促进根系对养分的吸收，同时可以提高根系抗逆性且改善根系生长。

我国有9900多万公顷的盐碱地。虽然大多数作物不能在盐碱地上生存，但一些耐盐性野生植物在历史的长河中存活、适应并繁衍后代。在长期的自然选择过程中，盐碱地野生植物根际微生物不断进化，并很好地适应了盐碱环境。在这些盐碱地野生植物的根际微生物群落中，存在一些可潜在的提高作物耐盐性的微生物种群。

现有的提高作物根系耐盐性的微生物菌剂及其制备方法多集中在耐盐性菌株的筛选上，但往往忽略了植物根系氮、磷、碳吸收的问题。

发明内容

有鉴于此，有必要提供一种能够提高作物耐盐性及促进根系吸收的促根抗盐的碳氮磷协同菌群的筛选方法；

还有必要提供一种促根抗盐的碳氮磷协同菌剂的制备方法；

还有必要提供一种促根抗盐的碳氮磷协同菌剂的应用。

一种促根抗盐的碳氮磷协同菌群的筛选方法，包括以下步骤：

采集样品：采集盐碱地野生植物的根系样品；

制备固态微生物接种原料：将采集到的盐碱地野生植物的根系样品利用微生物活性保持型缓冲液进行冲洗，并将冲洗得到的根系样品悬浮液进行离心过滤，得到离心沉淀和上清液，将得到的上清液放置于无菌的微孔膜中进行真空抽滤，然后将带有微生物的微孔膜用无菌剪刀剪成碎片，放入至上述离心沉淀的离心管中，与离心沉淀混合后制得固态微生物接种原料；

筛选异效碳源利用型协同抗盐菌群：将得到的固态微生物接种原料分成两份，分别接种在专化高盐缺碳液体培养基中，其中一份培养基中添加生物活性碳，另外一份添加生物惰性碳，筛选出异效碳源利用型协同抗盐菌群；

筛选促根抗盐的碳氮磷协同菌群：将筛选出的异效碳源利用型协同抗盐菌群接种到专化溶磷缺氮液体培养基中，筛选出促根抗盐的碳氮磷协同菌群；