[发明专利]一种板蓝根的组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种板蓝根的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：取板蓝根种子，清洗并灭菌后培养得到板蓝根幼苗，挑选幼嫩的板蓝根叶片或子叶节作为外植体，诱导愈伤组织与不定芽，将愈伤组织或不定芽进行继代增殖，产生丛生芽，丛生芽转接到无糖培养容器中进行生根培养，得到生根的板蓝根苗，然后进行练苗与移栽。本发明的板蓝根的组织培养快速繁殖方法可以为板蓝根优良品种的选育和菜用板蓝根工厂化生产提供理论与技术支撑，其优势在于可快速脱毒并繁殖、操作方式简单，具有良好的经济效益与生态效益。

技术领域

本发明涉及植物细胞工程技术领域，具体来说，涉及一种板蓝根的组织培养快速繁殖方法。

背景技术

板蓝根是一种主产于中国的常用中草药，常用别名有靛青根、蓝靛根、大青根，是十字花科植物菘蓝(Isatis tinctoria L.)的根，通常在秋季进行采挖，炮制后可入药，其味先微甜后苦涩，性寒，归心、肝、胃经，具有清热解毒、预防感冒、利咽之功效。主要用于治疗温毒发斑、大头瘟疫、舌绛紫暗、烂喉丹痧、痤疮等疾病，药用价值极高。根据利用方式，地上部分称为板蓝根，以叶入药的称为大青叶，在生活中以鲜叶作为菜用的称为菜用板蓝根，板蓝根食用价值高，芽苗菜具有清热解毒、排毒养颜的功效，其口感清淡，略带苦味，即可凉拌，也可炒菜、做汤，是一种保健蔬菜。菜用板蓝根一年四季均可栽培，可有效利用土地，同时增加农民收入。

我国板蓝根种植区，品种复杂且混乱，市场上伪劣品比较多，严重影响药厂投料的真实性及临床疗效。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种板蓝根的组织培养快速繁殖方法，能够克服现有技术的上述不足。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种板蓝根的组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

(1)准备外植体：取板蓝根种子，清洗并灭菌后放入MS或1/2MS培养基中培养，得到板蓝根幼苗，挑选幼嫩的板蓝根叶片或子叶节作为外植体；

(2)愈伤组织的诱导及芽分化：将幼嫩的板蓝根叶片或子叶节清洗并灭菌，切口向下栽在培养基上，诱导愈伤组织与不定芽；

(3)继代增殖：将步骤(2)得到的愈伤组织或不定芽转接到继代增殖培养基上进行继代增殖，产生丛生芽；

(4)生根培养：将步骤(3)得到的丛生芽转接到无糖培养容器中进行生根培养，得到生根的板蓝根苗；

(5)练苗与移栽：打开无糖培养容器的盖子，将生根后的板蓝根苗在室温放置一天，然后浇水并在室温放置5-6天，将生根后的板蓝根苗分成单株取出后栽于苗床。

进一步的，所述幼嫩的板蓝根叶片清洗及灭菌的具体操作为：将幼嫩的板蓝根叶片用洗洁精洗干净后，流水冲12h；75％酒精消毒30s，无菌蒸馏水冲洗3次；0.1％升汞震摇8-10min，无菌蒸馏水冲洗4-6次，5min/次。

进一步的，所述幼嫩的板蓝根叶片清洗及灭菌的具体操作为：将幼嫩的板蓝根叶片用洗洁精洗干净后，流水冲12h，暗处理6h；75％酒精消毒30s，无菌蒸馏水冲洗3次；10％-20％体积分数的84消毒液震摇30min，无菌蒸馏水冲洗4-6次，5min/次。

进一步的，所述子叶节清洗及灭菌的具体操作为：将子叶节用洗洁精清洗冲干净后，75％酒精消毒30s，无菌蒸馏水冲洗3次；0.1％升汞震摇5-8min，无菌蒸馏水冲洗4-6次，5min/次。

进一步的，所述愈伤组织的诱导及芽分化采用的培养基为MS、0.06-0.08mg/LTDZ、0.4mg/L NAA、30g/L白砂糖、5.8g/L琼脂组合的pH5.8-5.9的培养基。