[发明专利]一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的丹栀逍遥散的提取方法

说明书

本发明属于化合物提取技术领域，具体涉及一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的丹栀逍遥散的提取方法。该方法具体为：（1）选择栀子苷、芍药苷和丹皮酚为指标成分，采用高效液相色谱法进行指标成分含量测定；（2）混合对照品溶液的制备；（3）供试品溶液的制备；（4）标准曲线的建立；（5）实验设计与统计分析；（6）遗传算法搜索分析；（7）直接搜索法搜索分析。本发明先采用BBD‑响应面优化法建立数学模型、获得目标函数后，使用遗传算法及直接搜索算法搜索各因素的精确最优值。本发明选取栀子苷、芍药苷及丹皮酚为指标成分，结合本发明优化的提取方法，能够实现对丹栀逍遥散进行最大程度的提取，具有重要的研究意义。

技术领域

本发明属于化合物提取技术领域，具体涉及一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的丹栀逍遥散的提取方法。

背景技术

逍遥散出自《太平惠民和剂局方》，方由当归、茯苓、白术、柴胡、芍药、煨姜、薄荷、炙甘草组成。明·薛己在此基础上加牡丹皮和栀子，名加味逍遥散，又名丹栀逍遥散。具有养血健脾，疏肝清热之功用，是调和肝脾的代表方剂，是临床常用复方。因此，对丹栀逍遥散主要成分（含量高）和重要免疫活性成分的提取具有重要的研究价值。现有技术中，尚未有利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化提取复方丹栀逍遥散的相关报道。

发明内容

针对现有技术中存在技术空白的问题，本发明提供了一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的丹栀逍遥散的提取方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种利用响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化的丹栀逍遥散的提取方法，包括以下步骤：

（1）选择栀子苷、芍药苷和丹皮酚为指标成分，采用高效液相色谱法进行指标成分含量测定；

（2）混合对照品溶液的制备：精密称定栀子苷、芍药苷及丹皮酚对照品，加适量甲醇制成终浓度分别为74.9、56.2及33.4 μg/mL的混合对照品溶液；

（3）供试品溶液的制备：分别精密称取过4号筛的柴胡0.5 g、当归0.5 g、茯苓0.5g、白芍0.5 g、白术0.5 g、薄荷0.1 g、甘草0.4 g、牡丹皮0.75 g和栀子0.75 g药材粉末组成复方，按照液料比为（5-30）：1mL/g加入20-80%乙醇溶液，加热回流提取1-4次，提取时间为1.5-4h，提取液滤过后放冷、补足失重，离心，取1 mL上清液，用甲醇定容至10 mL容量瓶，微孔滤膜滤过后作为供试品溶液；

（4）标准曲线的建立：取混合对照品溶液，进行HPLC检测，分别进样1、2、4、6、8、10、20 μL，以质量浓度（μg）为横坐标（x），以峰面积为纵坐标（y）进行线性回归：栀子苷的回归方程为y=1483728x-12051（r=0.99995）；芍药苷的回归方程为y=927308x-20630（r=0.9975）；丹皮酚的回归方程为y=5116603x-44372（r=0.9999）；