[发明专利]用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片及方法

说明书

本发明涉及感染性疾病诊断标志物检测技术领域，具体涉及用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片及方法，包括上层滤纸芯片、中层滤纸芯片和下层硝酸纤维素膜；上层滤纸芯片和下层硝酸纤维素膜皆包括由中部向外辐射出的多个亲水区以及其余部分的疏水围堰，亲水区包括进样区和检测通道，上层纸芯片的检测通道包被各自对应的胶体金标记病原抗原及胶体金标记鼠IgG；下层硝酸纤维素膜的检测通道分别设有检测区和控制区，各检测区分别包被对应的非标记的病原体抗原，各控制区包披羊抗鼠IgG抗体。本发明所提供的用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片及方法，将免疫金标记技术与纸芯片相结合，实现了多重检测和半定量检测，检测结果及时准确。

技术领域

本发明涉及感染性疾病及其他疾病的诊断标志物检测的技术领域，具体涉及一种用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片及方法。

背景技术

传统的病原体检测方法中常用的有分离培养、ELISA(酶联免疫吸附实验)和PCR(聚合酶链式反应)。其中，分离培养耗时且方法复杂，并且不是所有的病原体都可以进行分离培养；ELISA和PCR灵敏度高，但价格昂贵，限制其在发展中国家、尤其是偏远地区的应用。这三种检测方法通常都需要耗时一个小时至几个小时，检测时间较长，不适合现场快速检验。

即时诊断(point-of-care testing，POCT)是在采样现场进行的、利用便携式分析仪器及配套试剂快速得到检测结果的一种检测方式，这种检测省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，能快速得到检验结果。免疫金标记技术是POCT应用技术之一，目前此技术与侧向层析相结合形成胶体金试纸条，胶体金试纸条具有廉价、快速、试剂用量少、样品量少、易操作等优点，因此得到了广泛的应用。胶体金试纸条检测成本低，检测灵敏度和准确度尚可接受，可用于疾病的大规模筛查或者部分疾病的快速诊断。

现有的胶体金试纸条检测方法具有如下缺点，(1)只能够进行定性检测，不能进行定量检测。(2)只能检测单一疾病，不能实现多重检测。(3)灵敏度不如ELISA。由于抗原抗体孵育时间短，或者抗体与纤维素膜非特异性相互作用会影响其灵敏性。

微流控芯片(microfluidics)又称微流控芯片实验室或芯片实验室(lab-on-a-chip，LOC)，是20世纪90年代在毛细管电泳基础上发展起来的一种新技术，通过微加工技术将微管道、微反应器、微电极、微检测器等不同功能的元件集成起来，具备将一个生物或化学实验室微缩到一块只有几平方厘米薄片上的能力。微流控技术因其所需样品体积小、检测效率高、使用成本低且易于和其他技术设备集成，具有良好的兼容性、有望实现便携式检测装置等特点，吸引了众多研究者的关注。近年，微流控芯片技术迅速向生物医学领域渗透，显示了广阔的应用前景，越来越多迹象表明这项技术已成为新一代医学研究和医学检测极其重要的平台。

微流控纸芯片装置主要由滤纸或纤维素膜等材料制成，是微流控芯片中最简单的一类。微流控纸芯片只要很少的样品和试剂就能够完成其他装置复杂的检测程序；白色的纸芯片使许多利用颜色变化来进行的检测变得更加方便；使用后的纸芯片焚烧即可销毁，处理简单，不产生有害残留。近年来，在医学上，纸芯片在蛋白检测，血液分离，细胞培养等方面发展迅速。

发明内容

本发明为了解决上述技术问题，提供了一种用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片及方法。

为了达到上述技术效果，本发明包括以下技术方案：一种用于平行检测多种感染性疾病标志物的纸芯片，包括上层滤纸芯片、中层滤纸芯片和下层硝酸纤维素膜；所述上层滤纸芯片和下层硝酸纤维素膜皆分别包括由中部向外辐射出的多个亲水区以及其余部分的疏水围堰，所述亲水区包括进样区和检测通道，各亲水区的进样区汇聚于对应滤纸芯片的中部，所述上层纸芯片的各亲水区的检测通道包被各自对应的胶体金标记病原抗原及胶体金标记鼠IgG；所述中层滤纸芯片上对应所述上层滤纸芯片的检测通道的液体流向的末端位置设有通样口；所述下层硝酸纤维素膜的各亲水区的检测通道由沿着液体流动方向分别设有检测区和控制区，各检测区分别包被对应的非标记的病原体抗原，各控制区包披羊抗鼠IgG抗体。