[发明专利]一种高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备方法及其产品

说明书

本发明提供了一种高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备方法，其中，所述方法包括通过使用重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养器，在重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维生长因子、维生素E和刺阿干树仁油等联合培养下，从脂肪中高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备生长，14天内30mL脂肪来源的细胞可培养获取1×10⁹以上的脂肪干细胞，能满足临床医学美容的大量细胞数，不用二次抽脂和减少抽脂带来的痛苦。根据上述方法，本发明还提供了一种高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备的产品，可用于高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备生长。

技术领域

本发明涉及一种高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备方法以及通过所述方法获得的高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备的产品。特别地，本发明涉及采用重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养板或培养皿和重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养瓶，在重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维生长因子、维生素E和刺阿干树仁油等联合协同培养下，从脂肪中高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备生长。本发明获得的脂肪干细胞可用于医学美容，包括皮肤除皱、祛斑和丰胸等领域。

背景技术

随着人们生活质量的提高，对身体健康以及美丽有了新的追求。医学美容目前得到前所未有的发展，而常用的医学美容主要方式是手术、仪器和化学品等进行，这些已远远不能满足人们的需要，都存在各种各样的问题，特别是这些美容材料对皮肤造成伤害或过敏反应。

近年来细胞技术逐渐得到大家的认可，如从皮肤中培养的成纤维细胞和脂肪中获取的脂肪干细胞等，都已经在医学美容上进行临床研究和应用，对皮肤皱纹、斑痕和丰胸等直接注射，使得这些细胞能在皮肤中分化生长，对皮肤起着填充和修复功能。脂肪干细胞是目前研究热点的一种成体干细胞，该细胞增殖能力比较好，体外培养能保持稳定的生长增殖活性，且具有多项分化潜能，也已被应用到美容治疗中。但通常脂肪干细胞在体外培养增殖时，生长速度慢，达到10⁸以上细胞数需要20天以上的时间，且还不能满足多次美容所需。很多美容者第二次美容可能需要进行再次抽脂，但这种痛楚非常痛苦，一般人难以接受。即便使用了局部麻醉，但是过后疼痛还是难以忍受。

综上所述，目前常用的脂肪干细胞培养方法获得脂肪干细胞数有限，脂肪干细胞增殖生长缓慢，经过传代培养3代需要30天以上，得到的脂肪干细胞数量低于10⁸。而且脂肪干细胞传代扩增不能超过5代，否则脂肪干细胞易出现分化和凋亡，细胞增殖和修复的功能明显也下降，具有干细胞特征的细胞显著减少，不能保证美容后脂肪干细胞的活性。本发明采用重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养板或培养皿和重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养瓶，在重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维生长因子、维生素E和刺阿干树仁油等联合培养下，促使脂肪干细胞高效增殖，可以获得大量的脂肪干细胞，满足美容者多次多疗程的进行美容，将对皮肤产生最佳的除皱、祛斑和丰胸等美容作用。

发明内容

为了高表达胶原蛋白的脂肪干细胞的制备，获得大量高活性的脂肪干细胞将有助于提高医学美容的效果。现有技术教导刺阿干树仁油具有很好的抗氧化、减少遗传损伤和抑制低密度脂蛋白的能力。发明人发现刺阿干树仁油可以促进脂肪干细胞诱导高表达胶原蛋白；更意外的发现是：发明人根据脂肪干细胞机体内存活和生长条件，在重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维生长因子、维生素E和刺阿干树仁油等联合培养下产生了预料不到的协同效果，其可有效地促使脂肪干细胞高表达胶原蛋白和高效增殖，获得大量的脂肪干细胞；尤其是在重组人IV型胶原蛋白α3包被的细胞培养器中，重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维生长因子、维生素E和刺阿干树仁油之间的协同效果更为明显，其更为有效地促使脂肪干细胞高表达胶原蛋白和高效增殖，可以获得更多的脂肪干细胞。这样一来，制备的脂肪干细胞可以多次多疗程进行医学美容，减少因而脂肪干细胞不足需要的再次抽脂，以及减少再次抽脂带来的痛楚。