[发明专利]草豆蔻中桤木酮的含量测定方法

说明书

本发明属于中药质量控制领域，尤其涉及一种采用GC/MS法测定草豆蔻中桤木酮含量的方法。本发明采用的气相色谱串联质谱(GC/MS)技术是利用气相色谱进行有机物的分离，并由串联质谱完成待测物的定性和定量分析。本发明相比于以往分析方法，具有高选择性、线性范围大、高灵敏度、高准确度与精密度、分析时间短、样品处理步骤简单、等优点，适用于桤木酮含量差异较大的食品、药品质量分析，可为含桤木酮的食品、药材质量评价研究及草豆蔻的药典改进提供全新的检测方法，同时也可为桤木酮的体内分析研究提供技术参考。

技术领域

本发明属于中药质量控制领域，尤其涉及一种草豆蔻中桤木酮的含量测定方法。

背景技术

草豆蔻(Alpinia katsumadai Hayata)又名草蔻、豆蔻等，为姜科(Zingiberaceae)山姜属(Alpinia Roxburgh)植物的干燥近成熟种子，主要分布于我国海南、广东、广西和云南等地，性温、味辛，归脾、胃经，具有燥湿行气，温中止呕功效；临床用于寒湿内阻，脘腹胀满冷痛，嗳气呕逆，不思饮食。草豆蔻化学成分主要为挥发油类、黄酮类、二苯庚烷类,尚有萜类、多糖等成分。二苯庚烷类化合物是具有1,7-二取代芳基并庚烷骨架结构化合物的统称，是一类低极性化合物，主要分为线性二苯庚烷类和环状二苯庚烷类，其中(4E,6E)-1,7-diphenylhepta-4,6-dien-3-one即桤木酮，为线性二苯庚烷类的重要代表之一。研究表明，以桤木酮为代表的二苯庚烷类化合物为一类重要生物活性成分，其在镇吐、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等方面表现出较好的药理活性。

镇吐作用：Yang Y等对草豆蔻药理作用研究表明二苯庚烷类化合物为其镇吐止呕的有效成分；而Daitetsu Shin等通过小鼠镇痛和家鸽止呕药效指标模型，对高良姜不同化学部位(即水提液、醇提液、挥发油、水提乙酸乙酯萃取物、醇提乙酸乙酯萃取物)进行筛选，结果显示各部位均具有镇痛、止呕双重药理作用，而且醇提物的活性强于水提物。

抗炎作用：黄文哲等证明豆蔻明、乔松素、桤木酮和山姜素对幽门螺杆菌有抑制作用，是其治疗胃部疾病的主要原因之一；还表明这4个化合物也是草豆蔻抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌等细菌的活性成分，但只有二苯庚烷类化合物桤木酮对幽门螺杆菌和金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌等都表现出了较强抑菌活性。YANG J等研究口服草豆蔻对鼠败血症的药理作用结果表明与显著降低血清炎性因子(TNF-α、IL-1β)水平有关。

抗癌作用：李元圆等通过对草豆蔻化学成分及体外抗肿瘤作用的研究，表明草豆蔻70％乙醇提取物的乙酸乙酯部位化学成分主要为二苯庚烷类成分桤木酮、豆蔻明、山姜素、乔松素，是草豆蔻的主要化学成分。而采用MTT法测定化合物对Bel7402和L0-2细胞增殖的抑制率，实验结果表明桤木酮能显著抑制Bel7402和L0-2细胞增殖，其他几种化合物对Bel7402和L0-2细胞增殖抑制不明显。

抗氧化作用：Lee Si Eun等研究发现高良姜提取液能减轻氧化剂H₂O₂对V79-4细胞繁殖的抑制作用，用高良姜提取液(100μg/ml)处理过的细胞比未处理过的成活率提高48％，推测与其活性成分二苯庚烷类等有关，且对自由基生成抑制作用明显。

目前，仅有文献和中国药典报道利用TLC和HPLC法对草豆蔻中桤木酮进行定性鉴别和含量测定，但TLC和HPLC定性定量方法操作繁琐，耗时长，定量不够准确，检测限较高，不适用于桤木酮低含量和含量差异较大的药材检测。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种草豆蔻中桤木酮的含量测定方法，具体为采用GC/MS法测定草豆蔻中桤木酮含量的方法。该方法可以高效率的对中药材草豆蔻中桤木酮进行鉴别及含量测定。

为了实现上述目的，本发明提供的草豆蔻中桤木酮的含量测定方法，具体包括以下步骤。

(1)供试品溶液的制备