[发明专利]一种郁金药材挥发性成分一测多评测定方法

说明书

本发明公开了一种郁金药材挥发性成分一测多评测定方法，所述方法步骤如下：(1)供试品溶液的制备：取郁金药材，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，过C8或C18固定相柱，流出液弃去，用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液定容，作为供试品溶液；(2)对照品溶液的制备；取莪术二酮，用甲醇溶解，定容，作为对照品溶液；(3)取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图；(4)先以对照品莪术二酮为参照，用外标一点法或工作曲线法计算供试品溶液中莪术二酮含量，再使用校正因子计算供试品溶液中姜黄烯酮，莪术烯醇，莪术酮及吉马酮的含量。该方法实现了同时测定5种倍半萜类成分，节约生产成本，提高生产效率和经济效益，方法快速、准确，能更全面的覆盖药材质量。

技术领域

本发明属于药物检测领域，具体涉及一种郁金药材挥发性成分一测多评测定方法，所述的方法包含5种倍半萜类成分的含量测定方法。

背景技术

由于自然界植物中化学成分的复杂性，单一指标成分无法准确的反应植物药的有效成分；且分别制定单一成分的含量测定，在测定方法实施过程中，对照品消耗量大，检测周期长、耗时耗力，效率低。

通过研究发现，不同物质在紫外检测器中的响应与其浓度的比值是一个常数，该常数称为相对校正因子。使用A对照品(易获得)外标法测定A化合物的峰面积，通过峰面积及A对照品浓度计算其含量；同时获得的B化合物的峰面积，通过校正因子计算获得B化合物的含量。该替代对照品法被命名为一测多评法。

由于大大减少了对照品的用量，尤其是难获得的对照品用量，并缩短了检测周期，一测多评的质量控制方法得到迅速的推广和应用。中国药典也已采纳该方法，对植物来源药物进行多指标含量测定，且数目仍在不断增加。

郁金，具有活血止痛，行气解郁，清心凉血，利胆退黄的功效，在安宫牛黄丸、十香返生丸、牛黄清宫丸、醒脑静注射液等均有使用。中国药典一部规定的郁金基原为三种，主要产地为广西、广东和四川。挥发油是中药郁金的主要活性成分，含量约为0.3％左右，多为倍半萜类化合物。单个含量测定的成分选择，将严重影响郁金成分测定方法的可靠性和实用性。

本发明对此进行了研究，找到了一种对郁金中5种倍半萜类成分进行检测的方法，从而解决了相关的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种郁金中5种倍半萜类成分的含量测定方法。

本发明的检测方法，可以从源头药材进行质量控制，探讨符合制剂要求的检测标准，从而保证最终产品质量的安全性、稳定性和有效性，达到快速、高效质量控制的目的。

本发明提供一种郁金中5种倍半萜类成分的含量测定方法，其特征在于，步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：取郁金药材，用水蒸气蒸馏法提取挥发油，过C8或C18固定相柱，流出液弃去，用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液定容，作为供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备；取莪术二酮，用甲醇溶解，定容，作为对照品溶液；

(3)取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，得到色谱图；

(4)先以对照品莪术二酮为参照，用外标一点法或工作曲线法计算供试品溶液中莪术二酮含量，再使用校正因子计算供试品溶液中姜黄烯酮，莪术烯醇，莪术酮及吉马酮的含量。

其中，步骤(1)方法如下：取粉碎过筛的郁金30g，加水1000-1500ml，提取芳香水500-1000ml，混匀，精密吸取5-10mL，通过C8或C18固相萃取小柱，流出液弃去，用1-10mL甲醇洗脱，收集洗脱液定容至1-10ml，摇匀，作为供试品溶液。

其中，步骤(2)方法如下：取莪术二酮适量，精密称定，用甲醇溶解，定容，如果使用外标法，则使用浓度为50μg/mL莪术二酮对照品溶液，如果使用工作曲线法，则采用浓度范围1-100μg/mL的至少五个梯度的莪术二酮对照品溶液。