[发明专利]一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法

权利要求书

1.一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

醇提：将干燥铁皮石斛叶粉粹，加入乙醇水溶液加热回流提取，回流提取温度为30～60min，温度为60～85℃，过滤收集滤液，滤渣重复提取2到3次，合并所有滤液；

将步骤1）的所有滤液减压浓缩除乙醇，得到铁皮石斛叶醇提物；

萃取：将步骤2）的铁皮石斛叶醇提物放入分液漏斗中，先用石油醚提取，重复1~5次，再用正丁醇提取，重复1~5次，收集正丁醇相，减压浓缩去除正丁醇，浓缩后得到的浸膏用去离子水复溶，得到铁皮石斛叶正丁醇部位提取物；

纯化：将步骤4）的铁皮石斛叶正丁醇部位提取物经大孔树脂吸附，以体积1~10BV的去离子水水洗大孔树脂，至流出液颜色接近无色，再以5~25%乙醇溶剂洗脱除去杂质，最后以30~80%乙醇洗脱得到洗脱液；

将步骤4）的洗脱液减压蒸发浓缩除乙醇，得铁皮石斛叶总黄酮提取物。

2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（1）所述的乙醇水溶液中乙醇的体积分数为60%～85%，所述铁皮石斛叶重量与乙醇溶剂体积之比为1：2～15，质量单位为mg，体积单位为mL。

3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（2）中浓缩温度为40～60℃。

4.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（3）中的铁皮石斛叶醇提物与每次提取所用的石油醚、正丁醇的体积比均为1：0.5～2。

5.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（4）中所述的大孔树脂吸附时的铁皮石斛叶正丁醇部位提取物中总黄酮浓度为0.1 ~5ml/min。

6.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（4）中铁皮石斛叶正丁醇部位提取物中的总黄酮浓度为0.1～5mg/mL，上样体积为1～50mL，上样后静置时间10~60min。

7.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（4）中两种不同乙醇洗脱液的上样流速均为0.1～5 mL/min，上样体积均为1～7BV。

8.根据权利要求1至6任一所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（5）中所述的减压浓缩的温度为20～55℃。

9.根据权利要求1至6任一所述的一种铁皮石斛叶总黄酮的提取与纯化方法，其特征在于，步骤（4）中所述的大孔树脂为D101、DM130、ADS-17和NKA-9中的任一种。