[发明专利]用于流式细胞仪的数据处理方法有效
申请号: | 201810501072.2 | 申请日: | 2018-05-23 |
公开(公告)号: | CN109030321B | 公开(公告)日: | 2020-09-15 |
发明(设计)人: | 钟金凤;陈忠祥;马玉婷;王策;严心涛;裴智果;吴云良;宋飞飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G01N15/14 | 分类号: | G01N15/14 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 韩飞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 细胞 数据处理 方法 | ||
1.一种用于流式细胞仪的数据处理方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)预先获取探测器增益实际值与探测器增益控制值之间的增益映射关系;
2)采集流式细胞仪原始数据,记录探测器增益控制值;
3)根据步骤1得到的增益映射关系计算得到对应的探测器增益实际值;
4)结合步骤3得到的探测器增益实际值,采用补偿算法或归一算法对流式细胞仪原始数据进行运算处理,得到新的流式细胞仪数据;
所述步骤4)中采用补偿算法对流式细胞仪原始数据进行运算处理,具体为:结合系统内置的初始荧光补偿矩阵和探测器增益实际值,利用补偿矩阵修正算法运算得到新的荧光补偿矩阵,再结合得到的新的荧光补偿矩阵利用补偿算法对流式细胞仪原始数据进行运算,得到新的流式细胞仪数据;
所述补偿矩阵修正算法具体包括以下步骤:
a)采集流式细胞仪的原始数据O,记录探测器增益控制值X,X=[x1 x2 ... xn]T,j=1,...n,xj为第j个荧光通道的探测器增益控制值,n为通道总数;
b)获取流式细胞仪系统内置的初始荧光补偿矩阵Kc0、自发荧光矩阵A0以及相应的探测器增益控制值X0=[x10 x20 L xn0]T;
c)根据预先得到的探测器增益实际值与探测器增益控制值之间的增益映射关系y=f(x),得到探测器增益控制值X和X0对应的探测器增益实际值Y和Y0,
其中,Y=[y1 y2 ... yn]T,Y0=[y10 y20 ... yn0]T;
d)计算新的补偿矩阵Kc,Kc等于初始荧光补偿矩阵Kc0点乘修正系数矩阵RK,即:Kc=Kc0·*RK,
其中,RK由探测器增益实际值Y与系统内置探测器增益实际值Y0运算得到:RK=(Y·/Y0)×(Y0·/Y);
·*定义为点乘,即两个矩阵位置对应的元素进行相乘;
·/定义为点除,即两个矩阵位置对应的元素进行相除;
利用补偿算法对流式细胞仪原始数据进行运算的方法具体为:新的流式细胞仪数据S等于流式细胞仪原始数据O减去自发荧光A再左乘荧光补偿矩阵Kc,即:S=Kc×[O-A],
其中,A为探测器增益控制值为X0条件下的自发荧光A0乘以各个通道的探测器增益实际值Y和Y0的比值RA,即A=A0g*RA,其中RA=Y·/Y0;
或者,
所述步骤4)中采用归一算法对流式细胞仪原始数据进行运算,得到新的流式细胞仪数据,该方法包括以下步骤:
I.确定各荧光通道所需要归一化的增益倍数G;
II.采集流式细胞仪原始数据O,记录探测器增益控制值X;
III.根据预先得到的探测器增益实际值与探测器增益控制值之间的增益映射关系y=f(x),得到探测器增益值实际值Y;
IV.计算新的流式细胞仪数据S:新的流式细胞仪数据S等于将所得到的流式细胞仪原始数据O除以各个通道中的对应的探测器增益实际值Y,并乘以对应的探测器的归一化增益倍数g,
即:S=(O·/Y)·*G;
其中:
·*定义为点乘,即两个矩阵位置对应的元素进行相乘;
·/定义为点除,即两个矩阵位置对应的元素进行相除;
Y=[y1 y2 ... yn]T,G=[g1 g2 ... gn]T;j=1,...n,yj为第j个荧光通道的探测器增益实际值,gj为第j个荧光通道的增益倍数,n为通道总数。
2.根据权利要求1所述的用于流式细胞仪的数据处理方法,其特征在于,所述步骤1)具体包括:预先采集若干探测器增益控制值数据及与之分别对应的若干探测器增益实际值数据,从而计算得到探测器增益实际值y与探测器增益控制值x之间的确定的一一对应的增益映射关系:y=f(x)。
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