[发明专利]一种双光子荧光pH探针的制备方法及其在细胞成像中的应用有效
| 申请号： | 201810475676.4 | 申请日： | 2018-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN108440386B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 黄池宝 | 申请（专利权）人： | 遵义师范学院 |
| 主分类号： | C07D209/86 | 分类号： | C07D209/86;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 贵州派腾知识产权代理有限公司 52114 | 代理人： | 谷庆红 |
| 地址： | 563000 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 光子 荧光 ph 探针 制备 方法 及其 细胞 成像 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.双光子荧光标记探针D1在制备用于探测细胞内pH水平、细胞异常信息的产品中的应用，所述双光子荧光标记探针D1具有以下分子结构：
2.根据权利要求1所述的双光子荧光标记探针D1的应用，其特征在于：所述的细胞为成纤维细胞。
3.根据权利要求1或2所述的双光子荧光标记探针D1的应用，其特征在于：将D1溶于生理盐水、乙醇、DMSO和聚氧乙烯60蓖麻油组成的混合溶液中，简称MIS溶液，采用HEPES即4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲溶液调节pH，在培养小鼠成纤维细胞后的培养基中加入1μmol﹒L-1荧光探针，并在30-40℃、含2-10％CO2的细胞培养箱中孵化20-50min，取出细胞并用缓冲溶液PBS冲洗3-4次，并于无色血清游离介质中再孵化10-20min，然后用共聚焦激光扫描显微镜：λex＝800nm,～1.5W、20倍目镜将射入的激光共聚焦于细胞上，收集600～650nm通道的荧光，由此获得细胞pH水平，实现对细胞是否异常的监测。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述生理盐水、乙醇、DMSO和聚氧乙烯60蓖麻油即CrEL的体积比为20：35：30：15。
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