[发明专利]一种用于人类Rh血型23个基因位点的基因分型检测试剂盒

权利要求书

1.一种对人类5号、19号、21号及X/Y染色体23个基因位点同时进行基因分型的复合PCR扩增系统，所述23个基因位点分为两组，第一组为12个基因位点：Box、IN07、pEx01、IN02、IN08、Ref19、SID1、SID2、Ex03、IN01、IN03、SID3；第二组为11个基因位点：AMEL、1227Ga、wD2_Gc、wD15_aG、wD1_gT、Dc、wD3_Cg、wD4_Cg、Ex10、Ee、SID4；所述复合PCR扩增系统包括第一组和第二组所述的PCR扩增引物，其中第一组包括下组位点对应的PCR扩增引物：

位点Box，相应引物序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示；

位点IN07，相应引物序列如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示；

位点pEx01，相应引物序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6所示；

位点IN02，相应引物序列如SEQ ID No.7、SEQ ID No.8所示；

位点IN08，相应引物序列如SEQ ID No.9、SEQ ID No.10所示；

位点Ref19，相应引物序列如SEQ ID No.11、SEQ ID No.12所示；

位点SID1，相应引物序列如SEQ ID No.13、SEQ ID No.14所示；

位点SID2，相应引物序列如SEQ ID No.15、SEQ ID No.16所示；

位点Ex03，相应引物序列如SEQ ID No.17、SEQ ID No.18所示；

位点IN01，相应引物序列如SEQ ID No.19、SEQ ID No.20所示；

位点IN03，相应引物序列如SEQ ID No.21、SEQ ID No.22所示；

位点SID3，相应引物序列如SEQ ID No.23、SEQ ID No.24所示；

其中基因位点Box、pEx01、IN02、IN08、Ref19、SID1、SID2、SID3对应的上游引物均采用FAM荧光素进行标记；基因位点IN07、Ex03、IN01、IN03对应的下游引物均采用FAM荧光素进行标记；

第二组包括下组位点对应的PCR扩增引物：

位点AMEL，相应引物序列如SEQ ID No.25、SEQ ID No.26所示；

位点1227Ga，相应引物序列如SEQ ID No.27、SEQ ID No.28、SEQ ID No.29所示；

位点wD2_Gc，相应引物序列如SEQ ID No.30、SEQ ID No.31、SEQ ID No.32所示；

位点wD15_aG，相应引物序列如SEQ ID No.33、SEQ ID No.34、ID No.35所示；

位点wD1_gT，相应引物序列如SEQ ID No.36、SEQ ID No.37、SEQ ID No.38所示；

位点Dc，相应引物序列如SEQ ID No.39、SEQ ID No.40所示；

位点wD3_Cg，相应引物序列如SEQ ID No.41、SEQ ID No.42、SEQ ID No.43所示；

位点wD4_Cg，相应引物序列如SEQ ID No.44、SEQ ID No.45、SEQ ID No.46所示；

位点Ex10，相应引物序列如SEQ ID No.47、SEQ ID No.48所示；

位点Ee，相应引物序列如SEQ ID No.49、SEQ ID No.50、SEQ ID No.51所示；

位点SID4，相应引物序列如SEQ ID No.52、SEQ ID No.53所示；

其中基因位点AMEL、1227Ga、wD2_Gc、wD1_gT、wD3_Cg、Ex10、SID4对应的下游引物采用TAMRA标记；基因位点wD15_aG、Dc、wD4_Cg、Ee对应的上游引物采用TAMRA标记。

2.如权利要求1所述的复合PCR扩增系统，其特征在于，第一组与第二组基因位点对应的PCR扩增引物的工作浓度为80～900nmol/L。

3.如权利要求1所述的复合PCR扩增系统，其特征在于，引物由SEQ ID No.1至SEQ IDNo.53所示寡核苷酸序列的PCR扩增引物的干粉或溶液组成。

4.一种对人类5号、19号、21号及X/Y染色体上23个基因位点进行Rh血型基因分型检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含含有权利要求1所述PCR扩增系统的引物组合物容器和PCR反应母液容器，其中，

所述引物组合物容器含有序列为SEQ ID No.1至SEQ ID No.53的引物的贮存液，贮存液中各引物的浓度为相应引物工作液浓度的4倍；

所述PCR反应母液容器内含有进行PCR反应的2倍反应浓度的PCR反应母液，PCR反应母液包含酶活为0.5～5U的DNA聚合酶，浓度为1～5mmol/L的镁离子，浓度为40～400μmol/L的dNTP及浓度为20～100mmol/L的Tris-HCl缓冲液。