[发明专利]一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法及应用

说明书

本发明公开了一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法，包括以下步骤：用甲醇溶液超声提取所述活血化瘀中药制剂，得样品溶液；将1,1‑二苯基‑2‑三硝基苯肼(DPPH)用甲醇溶解得DPPH甲醇工作溶液；将样品溶液、DPPH甲醇工作溶液、甲醇按特定比例配置成待测溶液、空白溶液和对照溶液，用酶标仪检测各溶液的吸光度，计算清除率；以Vc为内标物进行结果校正，以SR_样品/SR_VC表示所述活血化瘀中药制剂的抗氧化活性。本发明还提供了该检测方法作为血府逐瘀胶囊抗氧化活性检测方法的应用。

技术领域

本发明属于中药分析技术领域，尤其涉及一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法及应用。

背景技术

血瘀证包括血运不畅阻滞于静脉及脏腑，或离经之血积存于体内，或污秽之血所致的证候，可见于冠心病、脑血管病、肺心病、肝硬化等多种疾病。血瘀证患者多有血小板及凝血功能异常、血流动力学改变、外周循环障碍、炎症反应、结缔组织疾病中的至少一种情况。采用活血化瘀药物，特别是活血化瘀中药制剂是常用的治疗方法。

人体因为与外界的持续接触，包括呼吸(氧化反应)、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。血瘀证患者对体内自由基清除不足，过量的自由基会引起细胞氧化性损伤、脂质过氧化等，可以损害所有类型的生物分子—脂质、蛋白质、碳水化合物和DNA。从血瘀证角度来说，自由基中的羟自由基与脂质过氧化物是前列环素2(PGl2)合成酶活性的强烈选择性抑制剂，进而又可刺激血栓烷A2(TXA2)的合成，导致血管收缩、血小板聚集，从而导致微循环障碍。自由基还可导致血流流变学异常，降低红细胞膜的流动性，并使血红蛋白形成海因茨小体(Heinz小体)从而降低红细胞变形能力，使红细胞与血浆蛋白交联，提高血浆粘度，并降低红细胞滤过能力，还会破坏PGl2与TXA2的平衡，导致血小板聚集、血栓形成，进一步影响血液流变特性。可见，自由基能够参与血瘀证的发生，因此很多药物发挥其活血化瘀功效的作用机理之一即是对抗自由基(即抗氧化)。《中国药典》2015年版收录的活血化瘀中药制剂有很多种，如血府逐瘀胶囊，其由桃仁(炒)、红花、赤芍、川芎、枳壳(麸炒)、柴胡、桔梗、当归、地黄、牛膝及甘草11味中药组成，具有活血祛瘀，行气止痛之功效，主要用于治疗瘀血停滞胸中而见胸痛、头痛，痛如针刺而有定处，或呃逆干呕、烦急、心悸失眠、午后潮热，或唇舌紫暗、舌有瘀点、脉弦涩等症。但《中国药典》2015年版收录了血府逐瘀胶囊粉末鉴别、薄层鉴别以及含量测定等项，并未收录抗氧化活性检测方法。由于抗氧化与活血化瘀有着重要联系，因此建立抗氧化活性检测方法对于提高活血化瘀中药制剂的质量控制标准具有重要意义。

发明内容

针对现有技术中活血化瘀中药制剂的质量标准中没有抗氧化活性检测方法的问题，本发明提供一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法。

以及，本发明还提供按上述检测方法作为血府逐瘀胶囊抗氧化活性检测方法的应用。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下技术方案：

一种活血化瘀中药制剂的抗氧化活性检测方法，包括以下步骤：

步骤a、用25～75％v/v甲醇溶液超声提取所述活血化瘀中药制剂，得样品溶液，备用；

步骤b、取1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，用纯甲醇溶解，得1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液，备用；

步骤c、取所述样品溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液混合，得待测溶液，其中所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液中的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼与所述样品溶液中所述活血化瘀中药制剂的质量比为0.3：1～5；

步骤d、取所述样品溶液与25～75％v/v甲醇溶液混合，得空白溶液，其中所述样品溶液与所述甲醇溶液的体积比与步骤c中所述待测溶液中所述样品溶液与所述1,1-二苯基-2-三硝基苯肼甲醇工作溶液的体积比相等；