[发明专利]一种肿瘤淋巴结清扫新鲜组织标本的处理方法

说明书

本申请涉及一种肿瘤淋巴结新鲜组织标本的清扫方法，属于测试用样品制备技术领域。待处理新鲜组织标本先以化学方法增强脂肪细胞通透性处理，再置于室温条件的固定液中进行软脂处理2‑24小时后，切取淋巴结，脱水全埋、染色，即完成清扫工作；所述固定液包括甲醛、卵磷脂、无水乙醇和丙酮，各组分在固定液中的浓度分别为：甲醛50~150ml/L，卵磷脂30~70g/L，无水乙醇200~300 ml/L，丙酮200~300ml/L。将本申请应用于肿瘤淋巴结的清扫，不仅有效溶解脂肪组织、保证淋巴结及时充分的固定，还确保了淋巴结细胞形态保存完整，无变形，免疫组化效果好，有效提高了淋巴结检出数目和精确淋巴结转移阳性率。

技术领域

本申请涉及一种肿瘤淋巴结清扫新鲜组织标本的处理方法，属于测试用样品制备技术领域。

背景技术

现有新鲜离体标本通常是在福尔马林固定液中浸泡，这主要由于甲醛可以长时间并且很好的保存组织形态学结构特征，同时又具有良好的经济效用。此类标本处理方法虽然可以很好的固定组织的形态，但也使含有脂肪组织的标本变硬，在病理科取材特别是淋巴结取材时大大增加了难度。对于胃癌、肠癌、乳腺癌等肿瘤根治术标本中，彻底地淋巴结取材对肿瘤诊断分期、制定治疗方案及判断预后至关重要，而常规的固定液和现有的标本固定方法都无法满足在快速固定的同时提高淋巴结的取材速度和检出率，使得病理医生在长期的离体脂肪组织中手摸刀切式寻找淋巴结的方法存在取材不充分、操作时间长等诸多弊端，并最终影响病人的治疗方案、预后和转归。为解决现有肿瘤根治组织标本处理技术中存在的问题，临床实际工作中急需软化或者溶解脂肪的同时充分暴露和固定淋巴结、保持淋巴结组织结构和细胞形态完整的方法。

基于此，做出本申请。

发明内容

针对现有淋巴结检出技术所存在的上述缺陷，本申请提供一种全新的胃肠癌淋巴结清扫新鲜组织标本的处理方法，在软化乳化溶解脂肪的同时固定淋巴结，保证淋巴结结构的完整和最佳染色效果。

为实现上述目的，本申请采取的技术方案如下：

一种肿瘤淋巴结清扫新鲜组织标本的处理方法，待处理新鲜组织标本先以化学方法增强脂肪细胞通透性处理，再置于室温条件的固定液中进行软脂处理2-24小时后，切取淋巴结，脱水、包埋、切片、染色，即完成处理工作；所述固定液包括甲醛、卵磷脂、无水乙醇和丙酮，各组分在固定液中的浓度分别为：甲醛50～150ml/L，卵磷脂30～70g/L，无水乙醇200～300ml/L，丙酮200～300ml/L。

进一步的，作为优选：

所述的化学方法是指：先用HCl溶液处理新鲜组织标本5-20min，处理温度为室温；再将其浸泡在胰蛋白酶-EDTA中，浸泡选用35-39℃恒温水浴处理10-20min。

所述的HCl溶液浓度为0.005N-0.05N；胰蛋白酶-EDTA构成为：含0.1-2.5％(体积质量比)胰蛋白酶、0.001-0.1％(体积质量比)EDTA，PBS配制。

所述的新鲜组织标本以手术方式切除离体肿瘤淋巴结。上述处理方法适用于手术切除离体肿瘤淋巴结清扫标本的淋巴结取材。

所述固定液还包括有去氧胆酸、甲醇和PBS溶液，去氧胆酸在固定液中的浓度为30～70g/L，甲醇在固定液中的浓度为200-300ml/L，所述PBS溶液添加至固定液中其浓度为100-200ml/L。更优选的，所述固定液是由以下浓度比的各组分构成：甲醛100ml/L，卵磷脂50g/L，无水乙醇250ml/L，丙酮250ml/L，去氧胆酸47.5g/L，甲醇250ml/L，PBS溶液1×。