[发明专利]一种复方氨基酸注射液中有关物质的检测方法

说明书

本发明提供一种复方氨基酸注射液中有关物质的检测方法，该方法以5‑羟基色氨酸和L‑犬尿氨酸为指针性杂质，通过三氟乙酸‑七氟丁酸离子对色谱方法优化了氨基酸注射液中所含有的各种氨基酸和有关物质的分离和基线稳定性，检测灵敏度高，准确性和重现性好，能够满足复方氨基酸注射液中有关物质控制的要求。

技术领域

本发明涉及一种注射液中有关物质的检测方法，尤其是复方氨基酸注射液中有关物质的检测方法。

背景技术

氨基酸是构成人体蛋白质的基本单元，也是机体合成抗体、激素、酶和其他组织的原料。复方氨基酸注射液一般用于蛋白质摄入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需要的患者，亦用于改善手术后病人的营养状况。然而，各国药典均未收载复方氨基酸注射液有关物质检测方法。虽然有药典收载了氨基酸原料中有关物质的检测方法，但这些有关物质为氨基酸生产过程中残留的工艺杂质，多为内源性氨基酸，被复方制剂处方中其他氨基酸原料所涵盖，从而无法满足复方氨基酸注射液中有关物质检测的要求。

发明内容

本发明提供了一种复方氨基酸注射液中有关物质的检测方法，该方法确定了复方氨基酸注射液中的指针性杂质，检测灵敏度高，准确性和重现性好，能够满足复方氨基酸注射液中有关物质控制的要求。

本发明涉及一种复方氨基酸注射液中有关物质的检测方法，该方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液和对照品溶液的制备：

取复方氨基酸注射液直接用作供试品溶液；

配制至少3个不同浓度的5-羟基色氨酸对照品溶液和至少3个不同浓度的L-犬尿氨酸对照品溶液；

(2)取不同浓度的5-羟基色氨酸对照品溶液注入高效液相色谱仪，记录280nm波长下不同浓度的5-羟基色氨酸对照品溶液的色谱图，以5-羟基色氨酸的浓度为横坐标，以该浓度所对应的峰面积为纵坐标，制作标准曲线或回归方程；取不同浓度的L-犬尿氨酸对照品溶液注入高效液相色谱仪，记录365nm波长下不同浓度的L-犬尿氨酸对照品溶液的色谱图，以L-犬尿氨酸的浓度为横坐标，以该浓度所对应的峰面积为纵坐标，制作标准曲线或回归方程；

(3)取供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录280nm波长下和365nm波长下供试品溶液的色谱图，按标准曲线法，以供试品溶液280nm波长色谱图中5-羟基色氨酸的峰面积根据标准曲线或回归方程计算供试品溶液中5-羟基色氨酸的量，不得超过复方氨基酸注射液中色氨酸标示量的0.2％，以供试品溶液365nm波长色谱图中L-犬尿氨酸的峰面积根据标准曲线或回归方程计算供试品溶液中L-犬尿氨酸的量，不得超过复方氨基酸注射液中色氨酸标示量的0.2％；

其中，所述复方氨基酸注射液中含有色氨酸。

本发明的发明人经过大量研究发现，色氨酸是20种氨基酸中最不稳定的氨基酸，对于含有色氨酸的复方氨基酸注射液，5-羟基色氨酸、L-犬尿氨酸是最早出现、产生速度最快且量最多的杂质，从而将5-羟基色氨酸和L-犬尿氨酸确定为复方氨基酸注射液中的指针性杂质。

本领域技术人员可以理解，各种含有色氨酸的复方氨基酸注射液都可用本发明的方法检测其中的有关物质，包括但不限于：复方氨基酸(15)双肽(2)注射液、复方氨基酸注射液(18AA)(规格包括5％和12％)、复方氨基酸注射液(18AA-I)、复方氨基酸注射液(18AA-II)(规格包括5％、8.5％、11.4％)、复方氨基酸注射液(18AA-III)、复方氨基酸注射液(18AA-V)、复方氨基酸注射液(18AA-Ⅶ)、复方氨基酸注射液(20AA)、复方氨基酸注射液(15AA)、复方氨基酸注射液(14AA)、复方氨基酸注射液(17AA)等等，优选，复方氨基酸(15)双肽(2)注射液。