[发明专利]一种预防银杏茎腐病的促生制剂及制备方法

权利要求书

1.一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：绿针假单胞菌橙色亚种1.5-3.5份、甲基营养型芽胞杆菌5.6-7.8份、荧光假单胞菌4.3-6.5份及蒸馏水15.0-20.0份；所述促生制剂用于预防银杏茎腐病。

2.根据权利要求1所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，由以下重量份的原料组成：绿针假单胞菌橙色亚种2.5份、甲基营养型芽胞杆菌6.6份、荧光假单胞菌5.4份及蒸馏水18份。

3.根据权利要求1所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述绿针假单胞菌橙色亚种的培养方法为：在KB培养基上划线接种，非厌氧环境下，28℃下培养24h后菌落直径达2mm，菌落圆形微隆起，微黄色，边缘光滑，表面较湿润，易挑起，培养48h后菌体产生橘红色色素，覆盖在菌落表面，同时菌落周围产生橘黄色色素。

4.根据权利要求3所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述KB培养基的配方为：每1000毫升水中含蛋白胨20克、甘油15毫升、K₂HPO₄ 0.392克和MgSO₄ 0.732克，pH为6.5-7.5。

5.根据权利要求1所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述甲基营养型芽孢杆菌的培养方法为：先将甲基营养型芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度OD₆₀₀值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的甲基营养型芽孢杆菌的菌液，37℃培养。

6.根据权利要求5所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述种子培养基的成分为：胰蛋白胨10g/L、酵母提取物5g/L和NaCl 10g/L；所述100重量份培养基的成分为：葡萄糖15g，淀粉1g，豆饼粉25g，硫酸锰1g，磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁0.5g，酵母膏0.2g，氯化铁0.1g，碳酸钙0.1g，pH7.0-7.2。

7.根据权利要求1所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述荧光假单胞菌的培养方法为：在KB培养基上划线接种，非厌氧环境下，28℃下培养48h，在KB培养基上生长良好，菌落为隆起，淡黄色，边缘光滑，表面较湿润，易挑起；产生水溶性的黄绿色色素，在254nm紫外光照射下可见有强烈的黄绿色荧光产生，培养3-4d，水溶性色素会扩散至培养基中，黄绿色荧光逐渐减弱至消失。

8.根据权利要求7所述的一种预防银杏茎腐病的促生制剂，其特征在于，所述KB培养基的配方为：每1000毫升水中含蛋白胨20克、甘油15毫升、K₂HPO₄ 0.392克和MgSO₄ 0.732克，pH为6.5-7.5。

9.一种权利要求1所述的促生制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在KB培养基上划线接种绿针假单胞菌，非厌氧环境下，28℃下培养24h-48h；(2)将甲基营养型芽孢杆菌在种子培养基中培养至菌密度OD₆₀₀值为0.6-0.8，得到菌液，然后在100重量份培养基中接种2-5重量份的甲基营养型芽孢杆菌的菌液，37℃培养；(3)在KB培养基上划线接种荧光假单胞菌，非厌氧环境下，28℃下培养48h，在254nm紫外光照射下可见有强烈的黄绿色荧光产生，培养3-4d；(4)向容器中按配比添加蒸馏水，在室温下密封一段时间；(4)室温下，然后依次按配比添加绿针假单胞菌橙色亚种、甲基营养型芽孢杆菌和荧光假单胞菌，震荡均匀，即可。

10.一种权利要求1所述的促生制剂在预防银杏茎腐病中的应用。