[发明专利]一种豨莶草叶中奇壬醇分离纯化的方法

说明书

本发明公开了一种豨莶草叶中奇壬醇分离纯化的方法，包括如下步骤：(1)将豨莶草叶用乙醇，回流提取，过滤，收集滤液；(2)滤液浓缩，加热离心，取滤液；(3)将滤液用乙醇稀释，上AB‑8大孔吸附树脂层析柱，先用体积浓度为20～30％的乙醇冲洗10～20个柱体积，再以体积浓度为35～40％的乙醇冲洗12～16个柱体积，收集体积浓度为35～40％，浓缩至干，得到大孔吸附树脂柱纯化产物；(4)然后从所述的大孔吸附树脂柱纯化产物进行结晶纯化收集高纯奇壬醇晶体。本发明采用豨莶草叶为起始原料，从源头减少杂质，二萜类活性成分奇壬醇含量超过98％，总转移率大于60％。

技术领域

本发明涉及一种从中药中分离纯化活性成分的分离纯化方法。

背景技术

豨莶草为菊科植物豨莶Siegesbeckia orientalis L、腺梗豨莶Siegesbeckiapubescens Makino或毛梗豨莶Siegesbeckia glabrecens Makino植物干燥的地上部位。性辛、苦、寒，归肝、肾经。具祛风湿、利关节、解毒等功效，主治风湿痹痛、筋骨无力、四肢麻痹、半身不遂，风疹湿疮等症。主要化学成分为二萜类、倍半萜类、黄酮类、甾醇类、有机酸类等成分。现代具有抗风湿，抗炎，降血压，抗血栓，抗菌等药理作用，临床应用治疗风湿性关节炎，高血压，脑血栓等。现代研究发现豨莶草抗炎活性成分主要为豨莶二萜类成分(主成分为奇壬醇)，主要存在于豨莶草叶中，对风湿性关节炎具有良好的抗炎作用。在现有的市场中主要治疗风湿性关节炎的药物主要为非甾体消炎药、糖皮质激素类药物，因副作用较大不宜长期使用。

已经报道的奇壬醇提取纯化方法，多以豨莶草地上干燥部分为原料进行一系列的提取纯化工艺，得到较高纯度的目标化合物，但由于豨莶草中主成分集中予叶，在茎中含量甚微，枝中的活性成分也远低于叶。

有文献报道，豨莶草全草采用70％乙醇提取，浓缩回收乙醇，加水溶解上D101大孔树脂，利用不同浓度乙醇洗脱后.取50％乙醇洗脱部分上硅胶柱，利用甲醇和二氯甲烷为流动相洗脱，不同比例的的洗脱的洗脱成分在甲醇重结晶获得不同类别的二萜类成分。该方法步骤复杂，用的溶剂较大，回收率很低。

也有文献报道，豨莶草嫩茎叶甲醇超声提取，经DM101大孔树脂，然后梯度洗脱，取40-70％段经硅胶柱，用乙酸乙酯和乙醇洗脱，然后浓缩，用甲醇冷藏结晶。该方法步骤复杂，产率较低。目前缺少具体豨莶草叶中奇壬醇的分离纯化方法。

发明内容

本发明的目的是公开一种豨莶草叶中奇壬醇分离纯化的方法，以克服现有技术存在的缺陷。

本发明的方法，包括如下步骤：

(1)将豨莶草叶粉碎，用体积浓度为50％-90％的乙醇，回流提取1～2小时，优选1.5h，过滤，收集滤液，所述的乙醇的重量用量为豨莶草叶的18～25倍；

(2)滤液浓缩至原滤液体积的1/10～1/5时，加热至45～60℃，保持10～20分钟，优选15min，离心弃去沉淀，取滤液；

(3)滤液以体积浓度20～30％的乙醇稀释至原体积的4-7倍，上AB-8大孔吸附树脂层析柱，先用体积浓度为20～30％的乙醇冲洗10～20个柱体积(BV)，优选15个柱体积(BV)，再以体积浓度为35～40％，优选38％的乙醇冲洗12～16个柱体积，收集体积浓度为35～40％，优选38％的乙醇的洗脱液，浓缩至干，得到大孔吸附树脂柱纯化产物；