[发明专利]一种诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法

权利要求书

1.一种诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于包含如下步骤：

步骤(1)、不定芽诱导：剪取金樱子组培苗的无菌复叶，再切割成带小叶柄的单个叶片，将带柄的单个叶片背面朝下接种到不定芽诱导培养 基进行暗培养，所述的不定芽诱导培养基为1/2MS+NAA0-0.0005mg/L+TDZ1.5mg/L+CH（酸水解干酪素）100mg/L+AgNO₃10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L，pH值5.8-6.0；暗培养8-10天；将暗培养后的叶片转移到正常光周期条件下培养25-40天，叶柄处产生不定芽；

步骤(2)、不定芽增殖：切割分离不定芽，转移到增殖培养基中继续培养，培养20-30天产生丛生芽；所述的增殖培养基为MS+NAA 0.1mg/L+6-BA 1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L，pH值5.8-6.0；

步骤(3)、壮苗培养：将丛生芽切割分离成单芽体，转移到壮苗培养基中，壮苗培养25-40天，芽苗生长成 幼苗；所述的壮苗培养基不添加任何激素，为MS+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L，pH值5.8-6.0；

步骤(4)、诱导生根：将幼苗转移到生根培养基中诱导生根，培养20-30天后获得生根的幼苗；所述的生根培养基为MS+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L，pH值5.8-6.0；

步骤(5)、选择根系发达、生长健壮、株高不低于5cm的幼苗，洗净根部粘带的培养基，移栽到盆栽基质中，室内培养1个月，再转移至自然光照下培养，得到完整金樱子成年植株。

2.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(1)中，所述的暗培养的温度为25±2℃；所述的正常光周期培养条件为光照时间16h/d、光照强度为5000-10000lx、培养温度为25±2℃。

3.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(1)中，所述的不定芽诱导培养基为1/2MS+NAA0.0005mg/L+TDZ1.5mg/L+CH100mg/L+AgNO₃10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L，pH值5.8-6.0。

4.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(2)中，增殖培养条件为光照时间16h/d、光照强度5000-10000lx、温度25±2℃。

5.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(3)中，所述的壮苗培养条件为光照时间16h/d、光照强度5000-10000lx，温度25±2℃。

6.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(4)中，所述的生根培养条件为光照时间16h/d、光照强度5000-10000lx、温度25±2℃。

7.根据权利要求1所述的诱导金樱子叶片直接产生不定芽及植株再生的方法，其特征在于步骤(5)中，所述的盆栽基质的原料为泥炭土:蛭石:珍珠岩体积比为1:2:1，各原料121℃高温灭菌30分钟，冷却后混匀；

所述的室内培养条件为光照时间16h/d、光照强度5000-10000lx，温度25±2℃。